近年 ICC技术在下述方面的应用,令人注目,有着广阔的前景。现介绍如下:
胶体金溶液的制备有许多种方法,其中最常用的是化学还原法,基本的原理是向一定浓度的金溶液内加入一定量的还原剂使金离子变成金原子。目前常用的还原剂有:白磷、乙醇、过氧化氢、硼氢化钠、抗坏血酸、 枸橼 酸钠、鞣酸等,下面分别介绍制备不同大小颗粒的胶体金溶液。
示踪抗原的抗体必须具有高度特异性,尽量减少非特异性染色和干扰。因此染色前必须测定抗体的工作效价,并用严格的阳性对照。组织切片应当有连续切片的HE染色作对照。
关于自身抗体产生的机理众说纷纭,十分复杂,免疫细胞化学和其他方法的结合,有助于从形态、功能和代谢三个方面深入探讨。根据目前研究的情况,有以下几种学说。
真菌感染 的疾病包括白 念珠菌病 ,曲霉菌病和新型 隐球菌病 。常规镜检和培养,检出率低,早期诊断困难。免疫细胞化学检查方法可能具有一定的快诊价值,正在研究改进中。新型隐球菌抗体的免疫荧光检测取得良好的结果,阳性率可达79%。
应当根据设备条件,具备的抗体和示踪抗原的特点进行选择。我们的经验是:因胞浆性抗原含量较多,可以用简便和廉价的间接法甚至直接法免疫细胞化学染色;对膜抗原及其它一些微量抗原应当选用PAP或ABC法,如果同时进行两种以上抗原的检查,最好进行双标记和多标记免疫细胞化学染色;为了显示较弱的抗原,可以用对比染色技术,背景为另一种颜色,使阳性抗原着色更突出。
免疫细胞化学在病理学中的应用最为广泛,并取得了很大成果。
作冰冻切片的组织,若在动物试验可以先经过固定液灌注或浸泡固定,也可不固定先做冰冻切片。人的组织也可通过浸泡固定或不固定,这主要根据保存抗原性的需要而定。固定过的组织可用20%蔗糖PBS(0.01mol/l pH7.2)浸泡2~4h或在切片时用OCT包埋,以减少冰冻切片过程中冰晶的形成。如果切片还准备用于电镜包埋,则可经过5%,10%,20%浓度逐级递增的蔗糖...
免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光(黄绿色或桔红色),可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质、定位,以及...
核酸是生物体内的高分子化合物,包括DNA和RNA两大类。
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