CD 19 (B 4 )、CD 20 (B 1 )、CD 22 (Leu 14 ):三种抗体能检测前B细胞和B细胞的表面抗原,但不能检测浆细胞;L 26 :与大多数B淋巴细胞反应,特异性强并能用于石蜡切片。B细胞在分化的大多数阶段表面有免疫球蛋白(SIg)分子,每个正常B细胞在分化的不同阶段或同一阶段上可产生几种不同类型的重链IgM(μ)、IgD(δ)、Ig...
...0μl (2)冰浴30min至1h。中间摇动3次,以防受体菌沉底。 (3)42℃90s。 (4)37℃水浴5min。 (5)加入无相应抗生素的Lb200μl,混匀后,37℃水浴30~60min。 (6)分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布,室温下干燥,然后倒置于37℃温箱中培养过夜。 (三)转化子DNA的快速鉴定-快速细胞破碎法...
...细胞,根据前面介绍的双指标二维点图的办法,将某一细胞群框定;然后分别选用绿色荧光(GFL)和红色荧光(RFL)单指标直方图。在直方图上所出现的细胞均为阳性。可用改变GFL和RFL增益的办法,将细胞恰好调节 到左侧并设立游标(图10-12)。 然后再测试MsIg染色的阴性对照。某些细胞,由于膜上的Fc受体可以与对照抗体鼠Ig非特异性结合,因而有一定的背景染色,...
...链表现可以确定B细胞肿瘤。测定方法见(3)。 用SIg的最大缺点是它的“嗜细胞性”,因为正常B细胞、自然杀伤细胞(NK)、激活T细胞以及所有巨噬细胞均有Fc段受体,因而可以不同程度地与抗SIg单克隆抗体的Fc段结合而产生非特异性的结果,因此选择抗体时,应使用已被胃蛋白酶消化过的、Fc段也被去除的、仅留下来的F(ab’) 2 。 (2)FCM测定B细胞的临床指...
...的车轮状核位于胞浆一侧,胞浆特别丰富,染色时仅胞浆着色而核不着色等特点。同时应了解所研究的抗原在组织中的大致定位及分布规律。如分泌5-羟色胺的内分泌细胞多位于固有层间质内,VIP和SP分布在固有层神经末梢及粘膜下层的神经元,胃泌素细胞分布胃肠腺体细胞之间。CEA多分布在腺癌细胞,如果在固有层内出现阳性细胞,要谨慎对待,必须排除污染、内源酶或自发荧光,同时与连...
...y Asp Ala Gln Lys Lys Lys ras基因的表达产物Ras是一种 小分 子G蛋白,在信号 转导 中起重要作用,正常Ras的作用因其自身的GTP 酶活性 而受到严格控制,而突变了的Rad其GTP酶活性下降或丧失,失去了原有控制,致使 增殖 信号持续作用,细胞发生恶性转化,如图22-3所示。 图22-3 Ras与GTP/GDP的相互作用及突变...
...贫血 36 甲状腺功能亢进 24 甲状腺功能低下 55 糖尿 病 18 肝炎 37 Odger等(1968)发现恶性贫血病人胃粘膜内含IgA细胞减少到正常的10%,IgM细胞减至50%,而IgG细胞则增加至15%,后者选择性的出现在残余的壁细胞周围。Baur等(1968)用人胃粘膜匀浆中微粒体部分标记荧光素和9例恶性贫血病人胃粘膜切片反应,其中7例PCA阳性...
胶体铁的呈色产物亚铁氰化铁是一络合物(解离常数1×10-35),一经形成,难以再与其它化学物质发生反应。蓝色的亚铁氰化铁与棕色的DAB产物及黑色的银颗粒颜色对比明显,因此强结合免疫酶及IGSS进行光镜下抗原的双标及多标记。胶体铁(颗粒1nm)标记抗体直径比常用胶体金(5~40nm)及铁蛋白标记抗体(12nm)小,因而对固定组织具有更好的穿透力,可用于抗原的超...
从DNA水平上寻找确诊遗传病的指标或探讨遗传病和肿瘤的病因等方面,已取得很大成绩,这对产前诊断,早期确诊和突变基因携带者的检出等都有重要意义。所用的方法大体有以下几种。
PCR是体外酶促合成特异DNA片段的新方法,主要由高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤反复的热循环构成:即在高温(95℃)下,待扩增的靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板;而后在低温(37~55℃)情况下,两条人工合成的寡核苷酸引物与互补的单链DNA模板结合,形成部分双链;在Taq酶的最适温度(72℃)下,以引物3’端为合成的起点,以单核苷酸为原料,沿...
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