...放置5min,不断搅拌。过滤,用滤液进行标记抗体。剩余部分吸附在滤纸上,4℃干燥保存。 取抗体(20mg/ml)每毫升加入生理盐水和0.5mol/l pH9.0的碳酸盐缓冲液各1ml稀释。逐滴加入0.1ml RB200溶液,边加入边搅拌,在0~4℃中结合12~18h,再用生理盐水透析5~7h,经葡聚糖凝胶G-50柱层析,除去游离荧光素,分装,贮存于4℃备用。
...仪电源相连。 电源为具有稳压器的直流电源,常压电泳一般在100~500V,高压电泳一般在500~10 000V。 2. 操作法 (1) 电泳缓冲液 枸橼 酸盐缓冲液(pH3.0) 取枸橼酸 (C6H8O7·H2O)39.04g与枸橼酸钠(C6H5Na3O7·2H2O)4.12g,加水4000ml,使溶解。 (2) 滤纸 取色谱滤纸置1mol/L甲酸溶液中浸泡...
...corI切割DNA所产生的末端用[α-32P]dNTP标记。标记反应可在一种限制酶消解DNA后立即进行,不需去除限制酶或使其失活,也不需更换缓冲液,具有3’延伸的DNA末端不能被Klenow片段有效在标记,欲标记这类分子可用T4DNA聚合酶。 选用这种标记方法是为了产生可用于凝胶电泳时作大小参照物的DNA片段。因为标记的DNA片段与其摩尔浓度成比例,而不与片...
...法 (中国药典1990年版二部附录24页)测定,在320nm波长处有最大吸收。 检查 含量均匀度 取本品1片,置100ml量瓶中,加 磷酸盐缓冲液 (pH6.6)约80ml,待片剂溶胀后充分振摇,使甲硝唑溶解,加磷酸盐缓冲液(pH6.6)稀释至刻度,摇匀,滤过,弃去初滤液,精密量取续滤液5ml,照含量测定项下的方法,自“置25ml量瓶中”,依法测定含量,应符...
(1)Igg 10ml (6mg/ml)在0.01mol/l pH9.5碳酸盐缓冲液中透析过夜。 (2)将四甲基异硫近氰酸罗达明(每毫克IgG加入5~20μg)溶于二甲亚砜(1mg/ml),取此溶液300μl,一滴一滴加入蛋白质溶液中,同时电磁搅拌。 (3)在室温中搅拌2h,避光。 (4)把结合物移入直径3cm,高30cm大小的Bio –Gel P-6层析柱...
...抗原的浓度成正比,与同样条件下的已知浓度的抗原血清比较,即可求得待测血清的抗原含量。 二、试剂(以ApoB为例) 1.琼脂糖。 2.巴比妥钠缓冲液(μ=0.05,pH=8.6):巴比妥钠10.30g,巴比妥1.84g、甘氨荎1.0g、PEg 60004g,加900ml水加温助溶,待冷,加1mol/L调pH至8.6,混匀,转入1000ml容量瓶内,再加水到刻度...
...抗原的浓度成正比,与同样条件下的已知浓度的抗原血清比较,即可求得待测血清的抗原含量。 二、试剂(以ApoB为例) 1.琼脂糖。 2.巴比妥钠缓冲液(μ=0.05,pH=8.6):巴比妥钠10.30g,巴比妥1.84g、甘氨荎1.0g、PEg 60004g,加900ml水加温助溶,待冷,加1mol/L调pH至8.6,混匀,转入1000ml容量瓶内,再加水到刻度...
...抗原的浓度成正比,与同样条件下的已知浓度的抗原血清比较,即可求得待测血清的抗原含量。 二、试剂(以ApoB为例) 1.琼脂糖。 2.巴比妥钠缓冲液(μ=0.05,pH=8.6):巴比妥钠10.30g,巴比妥1.84g、甘氨?K1.0g、PEg 60004g,加900ml水加温助溶,待冷,加1mol/L调pH至8.6,混匀,转入1000ml容量瓶内,再加水到刻...
...而达到分离的目的。用免疫沉淀法或聚阴离子沉淀法使其在琼脂板上沉淀,对于LpX阳性的血清可以在加样孔的阴极端见到白色沉淀带。 2、试剂 巴比妥缓冲液500mmol/L:pH8.6,离子强度0.05。 1%琼脂用上述巴比妥缓冲液加热配制。 沉淀剂;每升中含MgCl 2 0.1mol,肝素2.5g及MaCl9g。 3.仪器:电泳仪。 4.操作: (1)制板 1%琼...
...0和154×2bp。 2.无标记对照DNA2 此管内有20μl pBR328 DNA200μg/ml,已用EcoRⅠ线性化。 3.DNA稀释缓冲液 有两管,每管1ml[成分为:Tris-HCl(10mmol/L),EDTA(1mmol/L),pH8.0(20℃)]内含鲑鱼精DNA(50μg/ml)。 4.标记对照DNA 此管内有50μl线性化pBR328DN...
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