...输尿管狭窄和移植肾的间质性肾炎有关的人类多瘤病毒BK病毒(BKV)和JC病毒(JCV)的分子特征已经逐步被阐明。 美国宾州匹兹堡大学医学中心的病理科的Fabien K. Baksh博士及其同事研究了19例同种移植病毒性间质性肾炎的石蜡包埋的肾组织。研究人员对组织切片应用聚合酶链反应扩增,分别应用内参照、BKV-和JCV-特异性引物进行扩增,随后DNA进行测序...
...输尿管狭窄和移植肾的间质性肾炎有关的人类多瘤病毒BK病毒(BKV)和JC病毒(JCV)的分子特征已经逐步被阐明。 美国宾州匹兹堡大学医学中心的病理科的Fabien K. Baksh博士及其同事研究了19例同种移植病毒性间质性肾炎的石蜡包埋的肾组织。研究人员对组织切片应用聚合酶链反应扩增,分别应用内参照、BKV-和JCV-特异性引物进行扩增,随后DNA进行测序...
...快,已有取代同位素标记法的趋势。地高辛配基随机标记DNA探针法,是较为成功的一种非同位素标记方法。其原理是:用化学方法把类固醇类半抗原地高辛分子连接在dUTP上(Dig-dUTP)。用随机引物及DNA多聚酶,以探针DNA为模板,合成互补DNA,化学修饰过的dUTP同时掺入到标记的DNA探针中。杂交后用碱性磷酸酶标记的抗地高辛单抗与标记探针DNA中的Dig-d...
...乙醇 和8M尿素作用下,发生变性,失去生物学活性,变性后如经过透析去除尿素,β巯基乙醇,并设法使疏基氧化成二硫键, 酶蛋白 又可恢复其原来的构象,生物学活性也几乎全部恢复,此称变性核糖核酸酶的复性。 许多蛋白质变性时被破坏严重,不能恢复,称为不可逆性变性。 四、蛋白质的沉淀 蛋白质分子凝聚从溶液中析出的现象称为蛋白质沉淀(precipitation),变性...
...骤包括高温变性,低温退火适温延伸三个步骤的反复热循环,其效率可使几个拷贝的模板序列甚至一个DNA分子扩增10 7 ~10 9 倍。大大提高了DNA的检测率。此法不足之外,在于其不能达到细胞或组织的定位。PCRIS技术的基本的原理是首先利用PCR技术将靶DNA片段扩增,然后用原位杂交细胞或免疫细胞化学技术通过标记的核酸探针与扩增了的DNA进行杂交显示和定位,其...
...3)1- 磷酸葡萄糖 +UTP UDPG+PPi( 焦磷酸 ) (4)UDPG+糖原(Gn) UDP+糖原(Gn+1) 糖原 合成酶 催化 的糖原合成反应不能从头开始合成第一个糖分子,需要至少含4个葡萄糖 残基 的α-1,4- 多聚葡萄糖 作为 引物 (primer),在其非还原性末端与UDPG反应,UDPG上的葡萄糖基C1与糖原分子非还原末端C4形成α-1...
执行生命功能、表现生命特征的主要物质是 蛋白质 分子 。 DNA 贮存着决定 生物 特征的 遗传信息 ,只有通过蛋白质才能表达出它的生命意义,直接决定 蛋白质合成 及蛋白质特征的不是 RNA 而是DNA,因而人们确定DNA是遗传信息贮存者后就推测DNA是通过RNA去决定蛋白质合成的。50年代末RNA 聚合酶 的发现开始证实了这一推测。 以DNA为模板合成RN...
...液(5min)→dH 2 O(2×5min)→干燥(温箱,数小时过夜)→用铝箔包好,室温备用。 注意:制备和保存过程中避免污染。 经上述处理的载玻片一般可存放半年以上(4℃可更长)。 (五)硅鱼精子DNA的制备 (1)在50ml灭菌聚乙烯管中加入1g鲑精DNA,加入15ml DEPC水使其浸泡5min至2h; (2)加入2.5ml 2mol/L HCl,室温...
...品作为杂质的蛋白质含量。 (三)核酸的变性、复性与杂交 1.核酸变性 核酸变性是指核酸双螺旋结构解开,氢键断裂,但并不涉及核苷酸间磷酸二酯键的断裂。若磷酸二酯键的断裂称为降解,核酸降解时,核酸分子量降低。而核酸的变性并不引起核酸分子量的变化。 引起核酸变性的因素很多。由于温度升高而引起的变性称热变性。如将DNA的稀盐溶液加热到50℃以上几分钟,双螺旋结构即破...
...、以及 线粒体 RNA的合成。转录作用停止于DNA模板的终止信号,蛋白质ρ因子可识别此信号,终止区常常转录出一段 反向重复序列 。 转录生成的RNA分子为 前体 RNA,必须经过必在的加工修饰,才能成为有功能的RNA分子,但真核生物的RNA转录后加工修饰比原生物复杂的多。 原核生物 转录生成的mRNA属于 多顺反子 形式,由于原核生物没有 核膜 ,转录与翻译...
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