...[2] 一些经修饰过的型式可作为生物 探针 ，绿色萤光蛋白基因也可以转殖到 脊椎动物 (例如: 兔子 上进行表现，并拿来映证某种假设的实验方法。 2008年10月8日，日本科学家下村脩、美国科学家马丁·查尔菲和钱永健因为发现和改造 绿色荧光蛋白 而获得了当年的诺贝尔 化学 奖。 [3] [4] 历史 维多利亚多管发光水母 野生型GFP(wtGFP) 在196...
利用 显微分光光度计 对细胞内原有能发光的物质或对细胞内各种 化学 成分用不同的荧光经 荧光探针 标记后进行定位、定性和定量地测定，称为显微荧光光度术， 也称 细胞 荧光光度术(cytofluorometry)。它是一种微观而灵敏的方法，对于研究细胞的结构、功能及其变化具有重要意义。
序列标志 位点 (Sequence Tagged Sites，STS) STS是对以特定对 引物 序进行PCR特异 扩增 的一类 分子 标记的统称。通过设计特定的引物，使其与 基因组 DNA序列中特定结合位点结合，从而可用来扩增基因组中特定区域，分析其 多态性 。利用特异PCR技术的最大优点是它产生信息非常可靠，而不像RFLP和RAPD那样存在某种模糊性
...体对照：用正常 兔血 清或 人血 清代替免疫血清，再用上法进行染色，结果应为阴性。②抗原对照：即类属抗原染色，亦应为阴性。③阳性对照。 间接法中上述方法称双层法（Double Layer Method）。另一种称夹心法，即用未标记的特异性抗原加在切片上先与组织中之相应抗体结合，再用该抗原之荧光抗体重叠结合其上，而间接地显示出组织和细胞中抗体的存在，方法步骤如...
免疫印迹法（immunoblottingtest，IBT）亦称酶联免疫电转移印斑法（enzymelinkedimmunoelectrotransferblot，EITB），因与Southern早先建立的检测核酸的印迹方法Southernblot相类似，亦被称为Westernblot。免疫印迹法（图15-12）分三个阶段进行。第一阶段为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电...
...显色。 （22）甘油 明胶 直接封片。 结果：杂交阳性部位着蓝黑色。 组织处理及预杂交所用器皿需高温消毒，实验者需戴手套。 （三）酶促生物素标记cRNA探针的应用 基本方法和放射性标记cRNA探针同，所不同的是探针浓度为2.5μg/μl。显示探针反应步骤如下。 （1）用PBS冲洗粘附有切片的载片2×3min。根据情况也可用漂洗法。 （2）将载片浸入0.3%H...
例如抗IgA血清的纯化方法---免疫吸收法。如分泌型IgA（SIgA）抗原纯度不高，所制的抗血清常与IgG呈交叉反应，为此需要吸收，常采用纯化的人IgG戊二醛聚合物加以吸收纯化。方法如下： 1．人IgG聚合物的制备在5ml含40mg/ml人IgG的0.1mol/l pH7.0磷酸缓冲溶液中，加入2.5%戊二醛溶液1ml，边加边搅，5min即出现混浊，逐现大块...
...的抗原）结合，形成抗原-抗体-荧光抗体的复合物。由于结合在抗原抗体复合物上的荧光抗全显著多于直接法，从而提高了敏感性。如细胞抗原上每个分子结合3～5个分子抗体，当此抗体作为抗原时又可结合3～5分子的荧光抗体，所以和直接法相比荧光亮度可增强3至4倍。此法除灵敏性高外，它只需要制备一种种属间接荧光抗体，可以适用于多种第一抗体的标记显示。这是现在最广泛应用的技术。
...再用蒸馏水洗1min，除去盐结晶。 3．用50%缓冲（0.5mol/L碳酸盐缓冲液pH9.0～9.5）甘油封固、镜检 4．对照染色 ①正常免荧光血清染色，如上法处理切片，结果应为阴性。②染色抑制试验（一步法）：将荧光抗体和未标记的抗体球蛋白或血清（相同）等量混合，如上法处理切片。结果应为阴性。为证明此种染色抑制不是由于荧光抗体被稀释所致，可用盐水代替未标记抗...
...括如下3点。 1.不完全性双重输尿管 上肾段功能存在而伴有输尿管-输尿管反流者：①双重输尿管汇合点在上1/3处，做纵行的输尿管侧侧吻合术；②双重输尿管汇合点在下1/3处，做上肾段的输尿管膀胱再植术。 2.完全性双重输尿管 上肾段功能存在而伴有膀胱-输尿管反流者，做输尿管膀胱再植术，加抗反流手术。 3.肾部分切除 如尿路感染无法控制，或有点滴性尿失禁（伴开口异...
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