单克隆抗体技术 (monoclonal antibody technology)，20世纪后期 免疫学 技术的重大突破，应用 B细胞 杂交瘤 技术产生 单克隆抗体 (McAb)。 B细胞杂交瘤是 免疫 的小鼠 脾细胞 （ B淋巴细胞 ）与小鼠 骨髓瘤 （一种 浆细胞瘤 ， 浆细胞 是B淋巴细胞系的终末形式） 细胞融合 而成的 杂交细胞 ，其核内含有双亲 细胞...
一、DNA探针的应用
...位素标记探针的研制引起重视，自Langer等（1981）合成了生物素化dUTP和NTP类似物以来，开创了用非同位素标记的新领域，用生物素标记核酸探针检测和识别特定的核酸序列，已广泛应用于临床检验和科学研究。Leary等（1983）用缺口平移法标记的生物素DNA探针成功地用于Southern印迹杂交技术。Forst等（1985）发表了光敏生物素直接标记核酸的简...
...此法应用得最广，现在已可测定300多种体内微量物质，包括肽类及非肽类 激素 、 蛋白类 激素、 维生素 、酶、 肿瘤相关抗原 、 病毒 、 核酸 及其 衍生物 、 环核苷酸 、 前列腺素 、药物等等，成为医学（包括 中国传统医学 ）研究、疾病诊断、药物血浓度监测、 计划生育 等不可缺少的重要技术。② 免疫 放射分析(IRMA)，与放射免疫分析不同，在这一方法...
...出生后诊断许多 疾病 。将来人类许多主要遗传疾病都可能用基因探针检测。然而，并不是每一个携带某种致病基因的人，都要患这种疾病。 一种称为印迹杂交的技术广泛用于鉴定、识别DNA。从被研究的 细胞 中提取出DNA，用一种称之为 限制性核酸内切酶 的酶，将其切成细小的节段。通过电泳技术，在 凝胶 中分离这些片段，将其置于滤纸上，加上标记探针。因为探针只与它的镜像结...
...位素标记探针的研制引起重视，自Langer等（1981）合成了生物素化dUTP和NTP类似物以来，开创了用非同位素标记的新领域，用生物素标记核酸探针检测和识别特定的核酸序列，已广泛应用于临床检验和科学研究。Leary等（1983）用缺口平移法标记的生物素DNA探针成功地用于Southern印迹杂交技术。Forst等（1985）发表了光敏生物素直接标记核酸的简...
PCR是体外酶促合成特异DNA片段的新方法，主要由高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤反复的热循环构成：即在高温（95℃）下，待扩增的靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板；而后在低温（37～55℃）情况下，两条人工合成的寡核苷酸引物与互补的单链DNA模板结合，形成部分双链；在Taq酶的最适温度（72℃）下，以引物3’端为合成的起点，以单核苷酸为原料，沿
...因和分子水平同时原位显示基因及其表达产物，形成了新的检测系统，为生物学、医学和各个领域分子水平的研究与诊断，开拓了广阔的前景。 免疫细胞化学技术日新月异，以惊人的速度发展。尤其是和分子生物学的理论和技术日益结合密切，基因探针、核酸分子杂交技术、原位PCR技术、核酸杂交和免疫细胞化学双标记技术、电镜杂交技术等成为免疫细胞化学技术的新发展成员，标志着免疫细胞化学...
...卵第一、二极体。取样不影响胚胎发育。检测用单细胞DNA分析法，一是 聚合酶链反应 （PCR），检测男女性别和单基因遗传病;另一种是 荧光原位杂交 （FISH），检测性别和 染色体病 。早在1964年Edwards就提出了PGD的思想。1989年Handyside AH首先将PGD成功应用于临床 ［7］ ，用PCR技术行Y染色体特异 基因体 外 扩增 ，将诊断...
...DNA，如λgt、EMBL和Charon 系列等。用这类载体可以得到包含105以上转化子文库，再经前面介绍的筛选方法筛选特定基因克隆。用这种技术获得的DNA探针不含有 内含子 序列。因此尤其适用于 基因表达 的检测。 （三）RNA探针 RNA探针是一类很有前途的核酸探针，由于RNA是 单链 分子，所以它与靶序列的 杂交反应 效率极高。早期采用的RNA探针是细...
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