过去20多年来,荧光成像技术应用于生物医药的各个领域都已取得了重要进展,其中,对药物输送载体的分布和细胞屏障的输送属性等药物释放研究产生了巨大影响。近日,有关人士在英国《药学进展文摘》中撰文对这一技术在药剂学领域的重要应用进行了总结。 文章指出,荧光探针和光学显微镜的进步使这一技术在生物医药领域的应用范围不断扩大。一方面,新的荧光探针的出现,包括绿色荧光蛋白...
1.原理染色体的化学成份是核酸和蛋白质两部分。核酸以DNA为主,蛋白质有组蛋白和非组蛋白两种。因此染色体经蛋白水解酶类物质处理后,蛋白质已被水解而使DNA分子中碱基暴露,由于碱基中G/C和A/T组合的比例不同,对染料结合的程度不一,如这一段A/T碱基的成份多,则Giemsa染料易与它结合成深染;另一段G/C碱基的成份多,则Giemsa染料不易与其结合,结果成...
...分辨者,有紫外/红外/荧光分光光度法、 X射线 结构分析法、 电子顺磁共振 , 电子自旋共振 和 核磁共振 法,以及 放射性核素 示踪和放射免疫分析法等。④根据疏水相互作用或氢键形成的引力进行分辨者,有反相 高效液相层析 、 分子杂交 技术等。⑤根据特异相互作用进行分辨者,有亲和层析、 免疫化学 分析法等。 二是经一系列不同的 化学 和 物理 方法处理,以求...
原位杂交组织化学(In situ hybridization histochemistry, ISHH)是应用已知碱基顺序并带有标记物的核酸探针与组织、细胞中待测的核酸按碱基配对的原则进行特异性结合,形成杂交体,然后再应用与标记物相应的检测系统,通过组织化学或免疫组织化学方法在核酸原有的位置进行细胞定位。这一技术为研究单一细胞中编码各处蛋白质、多肽的相应mR...
...应。 BRAB法和LAB示是Guesdon及其同事们(1979)建立的,由于这二种方法都需以生物素标记第一抗体,应用不如ABC法普遍。但用于免疫细胞中免疫球蛋白的显示具有特异性。二者比较,LAB法手续较简便,但灵敏度较低。 生物素—抗生物素染色法采用免疫细胞化学染色中各种常用固定剂(见附录),均可获得较满意的结果。但有实验报告推荐“PLP”固定液(即过碘酸—...
该技术方法是用生物素分别标记抗体和酶,然后以抗生物素为桥,把两者连接起来(图6-2)。 图6-2B RAB技术 检查抗原时,先用生物素标记的抗体与细胞(或组织内)的抗原反应,洗去未结合的抗体,加入抗生物素孵育后,洗去未结合的抗生物素,再加入已标记酶的生物素孵育,洗片,以细胞化学方法呈色反应。
一、免疫PCR
通过核酸标记技术可将细胞因子cDNA作为基因探钊检测细胞内细胞因子基因组DNA或mRNA。主要有以下几种方法: 1.应用同位素(或非同位素)标记的cDNA探针,检测经Northernblot后细胞因子mRNA水平或采用打点杂交法。 2.应用标记cDNA探钊与细胞或组织切片进行原位杂交,然后进行放射自显影。 3.细胞因子mRNA经反转录为cDNA,用特异性细胞...
凝集素的特性及标记原理详见第五章 ,近年来,凝集素电镜标记技术应用日益广泛,且获得较为满意的效果。凝集素电镜标记技术方法较多,常用的有凝集素—酶(常用为HRP)、凝集素—生物素—酶电镜标记技术。现将凝集素—酶电镜标记技术(包埋前染色)简介如下(Sterit 和Kreatzberg,1987)。 (1)固定:常用为PLP或多聚甲醛—戊二醛固定液。如为取脑组织,...
...们的结构如下: 有些核酸中含有修饰碱基(或稀有碱基),这些碱基大多是在上述嘌呤或嘧啶碱的不同部位甲基化(methylation)或进行其它的化学修饰而形成的衍生物。例如有些DNA分子中含有5-甲基胞嘧啶(m 5 C),5-羟甲基胞嘧啶(hm 5 C)。某些RNA分子中含有1-甲基腺嘌呤(m 1 A)、2,2-二甲基鸟嘌呤(m 2 2 G)和5,6-二氢尿嘧啶...
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