（1）用4%多聚甲醛（在0.05mol/l 磷酸缓冲液中，pH7.2）在原位固定（4 ℃ ）1h。 （2）用0.05mol/l PBS充分洗涤后，用HRP标记的抗体血清作用18h，再用PBS充分洗涤。 （3）2%戊二醛固定1h，再水洗。 （4）呈色反应，用DAB—H 2 O 2 呈色反应，水洗。 （5）1%锇酸后固定30min～1h，原位用环氧树脂包埋，光镜...
...P）的单克隆抗体的商品试剂（Mico Trak，Pathfinder，Monofluor）。结果判断：要衣原体数>10个才能判为阳性。 3．PCR检测衣原体DNA： （1）标本的处理： ①取材部位为子宫颈管，男性为尿道，将灭菌白金耳深入宫颈管或尿道1cm左右，转动数圈，停留约30s，取出后置标本缓冲液中。 ② 衣原体DNA提取： 将宫颈管内或尿道内刮取物置含...
...）镍网面A（树脂包埋） ①蒸馏水冲10min。 ②10% H 2 O 2 蚀刻10min室温 ③10%正常血清（以0.5mol/l Tris缓冲液pH7.4、含1%BSA和2%Tween20 稀释，简称TBT缓冲液）室温30min。 ④以滤纸吸去多余液体，覆于特异性第一抗体1：500（Tris 缓冲液，pH7.4,含1%BSA和0.1%叠氮钠）4 ℃ ，孵育...
蛋白质等生物分子在缓冲液中带负电荷或正电荷，在电场中向阳极或阴极运动，称为电泳。由于其等电点不同，分子大小、形状和荷质比的不同，使不同蛋白质分子具有不同的电泳迁移率，在一定的支持介质中可借以分离各种蛋白质。常用的电泳技术有：醋酸纤维素薄膜电泳、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫电泳等。
蛋白质等生物分子在缓冲液中带负电荷或正电荷，在电场中向阳极或阴极运动，称为电泳。由于其等电点不同，分子大小、形状和荷质比的不同，使不同蛋白质分子具有不同的电泳迁移率，在一定的支持介质中可借以分离各种蛋白质。常用的电泳技术有：醋酸纤维素薄膜电泳、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫电泳等。
...-4-甲基香豆素（7-amino-4-methyl coumarin, AMC）260μg溶于二甲亚砜25μl中。 （2）将上液加入10ml IgG的 巴比妥缓冲液（0.5mol/L,pH8.5,内含50～100mg IgG）中，室温反应2h，过Sephadex G-50除去游离荧光素。 AMC呈黄色结晶固体，最大吸收波长354nm,最大荧光波长430nm。
...的单克隆抗体的商品 试剂 （Mico Trak，Pathfinder，Monofluor）。结果判断：要衣原体数>10个才能判为阳性。 3．PCR检测衣原体DNA： （1）标本的处理： ①取材部位为 子宫颈管 ，男性为尿道，将 灭菌 白金耳深入宫颈管或尿道1cm左右，转动数圈，停留约30s，取出后置标本 缓冲液 中。 ② 衣原体DNA提取： 将宫颈管内或尿道...
（一）cRNA探针的同位素标记 1．标记液（转录标记） 2．转录缓冲液 ※：用地高辛或生物素标记时，用UTP替代。 3．标记终止液 4．标记探针水解液 先用dH 2 O悬浮探针，再加入后两种试剂，轻轻振摇混合，于60℃条件下反应。 5．探针水解时间 注：L O －探针初始长度（kb） L f －探针的终长度（kb） K－0.11kb/min 6．探针水解终止...
...的 启动子 区和开始的4个 外显子 序列、 晚期 抗原 gp64基因以及 磷酸 化蛋白pp71基因序列。常用的引物和探针列在表3中。 （四）PCR扩增步骤 1．10×反应缓冲液：100mmol/L Tris-HCl、pH8.4，500mmol/L KCl，25mmol/L MgCl2，2mg/ml 明胶 。 Taq DNA 聚合酶 ：5U/μl 。 10×d...
...的 启动子 区和开始的4个 外显子 序列、 晚期 抗原 gp64基因以及 磷酸 化蛋白pp71基因序列。常用的引物和探针列在表3中。 （四）PCR扩增步骤 1．10×反应缓冲液：100mmol/L Tris-HCl、pH8.4，500mmol/L KCl，25mmol/L MgCl2，2mg/ml 明胶 。 Taq DNA 聚合酶 ：5U/μl 。 10×d...
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