...)假阴性:出现假阴性结果最常见的原因是:Taq DNA 聚合酶 活力不够,或活性受到抑制; 引物 设计不合理;提取的模板质量或数量不过关以及PCR系统欠妥当;循环次数不够。所以在实验中出现假阴性失败时,首先在原来 扩增 的产物中再加入Taq DNA聚合酶、增加5-10次循环,一般都会获得成功。如果没有成功应检查PCR扩增仪的温度是否准确, 采集标本 是否有问...
寄生虫标本的保存,除制成玻片标本永久保存外,还可用以下各种保存方法。 一、原虫包囊和虫卵的保存 汞碘醛液10ml与粪便1g混匀后密封在瓶内,可保存其中的原虫包囊及虫卵数月之久,也可在经浓集法处理的粪便沉渣中加等量或1倍量的10%甲醛液(加热至70℃),摇匀,用石蜡封固瓶口。 二、蠕虫成虫的保存 1.线虫 生理盐水洗净后用加热至70~80℃的70%酒精或巴氏液...
a1 查菌 a1.1 标本制备 除常规部位如耳垂、眶上及颌下外,要在2~3块活动性皮损的边缘上取材,共5~6处;以75%酒精棉球擦拭皮肤后,用左手中指和食指将皮肤捏紧,使变苍白,右手持消毒手术刀,用刀尖切一长5mm,深2~3mm的切口,然后转持刀柄90°,来回刮取切口边缘和底部的组织液,再均匀地按顺序在清洁的载玻片上涂成直径5~7mm的薄膜。刮取时应注意防止...
聚合酶链反应 (polymerasechain reaction简称PCR)又称无细胞 分子克隆 系统或特异性 DNA 序列体外 引物 定向酶促 扩增 法,是 基因扩增 技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍,从而大大提高对DNA 分子 的分析和检测能力,能检测单分子DNA或对每10万个 细胞 中仅含1个靶DNA分子的样品,因而此方法立即...
液浸标本 即用70%酒精或5%~10%福尔马林等固定液保存的标本,装于大小适当的 玻璃 瓶或塑料管(瓶)内,附上铅笔写的记录标签,如满保存液,不留空隙,盖紧瓶(管)塞,用蜡封口,随后,将之放于木匣内,两者之间的四周可用碎纸或 棉花 塞紧,将木匣装钉严密,匣面注明瓶子朝上一端的记号,即可邮寄。 干制标本 主要是干制昆虫标本,单个针插于玻璃管内或多量昆虫存放于玻...
免疫酶细胞化学技术可用于包埋前和包埋后染色,但以前者应用较多。
正确地收集、运送和保存标本是十分重要的环节,不恰当的标本收集与保存,往往是导致实验结果不可靠的主要原因,且又往往不易被检测者发现,因而必须予以重视。 ⒈标本收集前应考虑的因素 包括病人的饮食、药物与采集的时间等。有些化学组成容易受到饮食成分的干扰,有时还可受到近期食谱的影响。许多药物可干扰测定结果,应加以注明,并尽可能在试验前停药。有些药物可能对某一种测定方...
血液标本的采集是分析前质量控制的重在环节,可分为毛细血管采血法和静脉采血法。需要血量较少的检验,如手工法或半自动血细胞分析仪血细胞计数,常用毛细管采血法。需血量较多检验,如红细胞比积、临床生化检验、全自动血细胞分析血细胞计数一般用静脉采血法。特别是全自动血细胞分析仪,无论仪器进样品多少,为防止血样中小凝块的形成,保证仪器进样时标本能充分混匀,原则上均应使用静...
...两个酶(RT和Taq)催化,因而影响因素较多。1989年Wang等报道了低丰度mRNA绝对定量方法。利用浓度已知且与待测靶mR-NA序列相同的内对照mRNA(其片段长短不同,便于PCR扩增后产物的分离),在同一体系中,用相同的由 32 P标记的引物与待测mRNA一同进行逆转录和PCR扩增,扩增产物电泳后,分别测定二者产物放射性强度,由预先制备的标准曲线推算出...
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