以 DNA 为模板合成 RNA 是生物界RNA合成的主要方式,但有些 生物 像某些 病毒 , 噬菌体 它们的 遗传信息 贮存在RNA 分子 中,当它们进入宿 细胞 后,靠复制而 传代 ,它们在RNA指导的RNA 聚合酶 催化 下合成RNA分子,当以RNA模板时,在RNA 复制酶 作用下,按5'→3'方向合成互补的RNA分子,但RNA复制酶中缺乏校正功能,因此...
...物。因而,常常使用碱性磷酸酶去除5’磷酸基团以抑制质粒DNA的自身连接和环化。用细菌碱性磷酸酶(BAP)或牛小肠碱性磷酸酶(CIP)去除线状DNA两端的5’磷酸可以最大限度地减少质粒DNA的自身环化。而具有5’末端磷酸的外源DNA片段可有效地与去磷酸化质粒DNA相连接,产生一个含有两个切口的开环分子。因为环化DNA(即使只带切口的环状DNA)的转化效率比线状...
...各DNA片段克隆的集合体,就称为基因组DNA文库(genomic DNA library)。如果这个文库足够大,能包含该生物基因组DNA全部的序列,就是该生物完整的 基因组文库 ,能从这文库中钓取该生物的全部 基因 或DNA序列。从基因组含有生物生存、活动和繁殖的全部 遗传信息 的概念出发,基因组文库是具有生物种属特异性的。 构建基因组文库,再用 分子杂交 ...
...两个片段,一个片段分子量为76000,有聚合酶活性,并有3’→5外切酶活力,即Klenow片段(Klenow fragment)。另一个片段分子量为34000,具有5’→’3’外切酶活力。因此,DNA聚合酶具有几种功能:一是聚合作用,以DNA为模板,将dNTP中的脱氧单核苷酸逐个加到3-OH末端。二是有’3’→5’外切酶活力,能识别和消除错配的引物末端,与复...
重复性交是指在一个晚上或在较短时间内发生2次以上性交。有些人由于第一次性交时射精过快,双方都达不到性高潮,而在第二次性交时射精时间相对延长,所以干脆把第一次性交作为形式,只求在第二次性交中获得性满足。但这种办法只能作为权宜之计,不宜作为常规的防止早泄的方法。如果一个人入睡前性交容易射精,而在下半夜睡醒之后进行性交时射精时间延长,那么可以改变性交时间。若重复性...
...长并呈白色的 菌落 ,其细菌中就很可能含有插入目的序列的重组质粒,这样就很容易获得目的序列的克隆。 根据重组载体的标志来筛选,可以筛选去大量的非目的重组体,但还只是粗筛,例如细菌可能发生 变异 而引起抗药性的改变,却并不代表目的序列的插入,所以需要做进一步细致的筛选。 二、 核酸 杂交法 利用标记的核酸做 探针 与转化细胞的DNA进行 分子杂交 ,可以直接筛...
...含量。 每克样品中含氮克数×6.25×100=100克样品中蛋白质含量(克%) 二、蛋白质的基本组成单位—— 氨基酸 蛋白质可以受酸、碱或酶的作用而水解。例如,一种单纯蛋白质用6N 盐酸 在 真空 下110℃水解约16小时,可达到完全水解(酸水解的条件下, 色氨酸 、 酪氨酸 易被破坏)。利用层析等手段分析 水解液 ,就可证明组成蛋白质 分子 的基本单位是氨...
高等 生物 所处的环境无时无刻不在变化,机体功能上的协调统一要求有一个完善的 细胞 间相互识别、相互反应和相互作用的机制,这一机制可以称作细胞通讯(Cell Communication)。在这一系统中,细胞或者识别与之相接触的细胞,或者识别周围环境中存在的各种信号(来自于周围或远距离的细胞),并将其转变为细胞内各种 分子 功能上的变化,从而改变细胞内的某些 ...
...见酶含有的金属离子有K+、 Na +、 Mg 2+、 Cu 2+、(或Cu+)、 Zn 2+和Fe2+(或Fe3+)等。它们或者是 酶活性 的组成部分;或者是连接 底物 和酶分子的桥梁;或者在稳定酶蛋白分子 构象 方面所必需。小分子有机化合物是些 化学 稳定的小分子物质,其主要作用是在反应中传递电子、质子或一些基团,常可按其与酶蛋白结合的紧密程度不同分成 辅...
...结构及其功能。由于核酸的主要作用是携带和传递信息,因此 分子遗传学 (moleculargenetics)是其主要组成部分。由于50年代以来的迅速发展。该领域已形成了比较完整的理论体系和研究技术,是目前分子生物学内容最丰富的一个领域。研究内容包括核/ 基因组 的结构、 遗传信息 的复制、 转录 与翻译,核酸存储的信息修复与 突变 , 基因表达 调控和 基因工...
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