在研究心血管疾病时,主要运用显微注射法、基因打靶或基因剔除等方法制备各种TGM模型。 1.显微注射法 Gordon等人首次成功地将含有HSV和SV 40 DNA片段的重组质粒DNA以显微注射法导入小鼠受精卵的雄原核内,得到了带有这种外源DNA顺序的TGM。1982年Palmiter等运用此法得到的所谓“超级巨鼠”(supermouse)曾引起整个生物学界的轰...
亚硫酸氢钠 穿心莲 内酯的制备 1 取穿心莲内酯100g, 加95%乙醇1500L加热溶解。 2 取1mol/L的Na2so4 400ml, 加2%H2SO4 480ml混合,加水至800ml。 3 将穿心莲内酯溶液倒入(2)液中,摇匀,加热回流30’后,加2%H2SO4使PH6-7, 回收乙醇至无醇味,用等体积氯仿提取3次,分出水层,并蒸出水至小体积。加醇...
...民达到最高可能的健康水平”。要提高人们的健康水平,首先要正确认识健康的概念,世界卫生组织给健康下的定义是“健康不但是没有 疾病 ,还要有完整的 生理 、心理状态和社会适应能力”。 护士是人类健康的卫士,国际护士会在护理学国际法中规定护士的基本职责为“保存生命,减轻痛苦,促进健康”。因此,作为一位合格的护士,必须首先了解人(病人)的一般特性,把握由人(病人)的...
1975年Kohler和Milstein发现将小 鼠骨 髓瘤细胞与和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交瘤细胞既可产生抗体,又可无性繁殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破使血清学的研究进入了一个高度精确的新纪元。 免疫细胞化学的 技术关键之一是制备特异性强、亲合力大、滴度高的特异性抗体,由于每种抗原都有几个抗原决定簇,用它免疫动物将...
...保存2年,其效价稍有降低。抗体切忌反复冻融,否则抗体效价很快降低,以颈动脉一次性放血为宜。 2.单克降抗体的制备 单克隆抗体是一种高度特异性的抗体。单克隆抗体与多克隆抗体有一定的差别。抗体含量比较,单克隆抗体浓度高, 腹水 中可达0.5~10mg/ml,而多克隆仅0.1~1.0mg/ml;结合特性,单克隆抗体仅与单个抗原决定簇结合,特异性和亲和力高,多克隆抗...
...加热5 d变色,表明处方7、处方8所用的辅料与主药有相互作用,经进一步试验表明,蛋白糖引起片剂变色,而另甜味剂阿司帕坦不引起片剂变色;酒石酸的加入有利于掩盖主药的涩味;甘露醇的加入有利于克服沙砾感。综合考虑处方9崩解时间、口感、稳定性均较好,因此选用处方9作进一步的试验。2 制备工艺筛选 口腔速崩片的制备方法一般包括湿法制粒压片法、粉末直接压片法和冷冻干燥法...
用免疫斑点法或免疫细胞化学染色等方法可鉴定抗体的标记效果 1.免疫斑点法 在处理好的硝酸纤维素膜上分别滴加100~10-7系列稀释的抗原,斑点直径0.25cm, 空气中干燥,80℃多聚甲醛蒸气固定1h,然后分别以胶体铁标记的抗体一步法或用桥抗联接胶体铁标记物的间接法染色,普鲁士蓝呈色观察。一步法所难检测到的抗原量为10-2~10-3μg,间接法 敏感性至少增...
从分子水平来说,基因有三个基本特性:①基因可自体复制;②基因决定性状,即基因通过转录和翻译决定多肽链的氨基酸顺序,从而决定某种酶或蛋白质的性质,而最终表达为某一性状;③基因的突变,即基因虽很稳定,但也会发生突变。一般来说,新的突变的等位基因一旦形成,就可通过自体复制,在随后的细胞分裂中保留下来。
...2个 壳微粒 组成,内核直径为6~20nm ,含20~30% 单链 RNA 。其 蛋白质 成份主要由4个肽(VP1~VP4)构成,其中VP2和VP4是由VP0裂解而来,在几乎所有小RNA病毒颗粒中都含有1个或数个这样的未裂解成份。 肠道病毒 中有一些型或同一型中的某些株具有 血凝 活性。 (二)培养特性 肠道病毒在灵长类 上皮样细胞 中生长最好。常用的有猴肾...
有了质量好的抗原,还必须选择适当的免疫途径,才能产生质量好(特异性强和效价高)的抗体。 (一)用于免疫的动物 作免疫用的动物有哺乳类和 禽类 ,主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等,实验室常用者为家兔、 山羊 和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量,如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清,多用家兔和山羊,因动物反应良好,而且能够提供...
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