...能反映肝细胞线粒体 苹果 酸脱氢酶(m-MDH)的方法,在判断肝细胞病变估计肝病患者预后方面具有一定的价值。 还有人探讨了 过氧化物 体中的酶,如 过氧化氢酶 ,与内质多有关的酶,如 阿司匹林 酯酶 变化对肝病的诊断价值,但尚看不出有任何明显的临床意义。 (二)肝细胞的不均一性 近年来通过 组织化学 定性研究 , 显微分光光度计 定量测定、 电子显微镜 观察...
以氰化高铁血红蛋白为底物测定NADH-MetHb还原酶活性,或以二氯酚靛酚为底物测定黄递酶活性,或以细胞色素b5为底物测定b5R活性。需强调指出的是,由于不同遗传变异型的作用机制不同,试管中(高底物浓度下)测定的结果并不能确切地反映在活细胞内(低底物浓度下)催化效率减低的程度。因为,如果酶分子结构的改变使其与底物NADH的亲和力减低(Km值增大),在生理情况...
除了上述主要因素外,一些其它因素也会影响 酶活性 ,如反应体系中含有氧化剂,可氧化 酶蛋白 中 甲硫氨酸 、 色氨酸 和 酪氨酸 残基 ,使酶 失活 , 试剂盒 中常用的一些 表面活性剂 如Tween-80、Brig-35等会抑制一些酶的活性。 其它因素中,对酶测定而言,最重要的是 抑制剂 的作用,抑制作用是酶学中的一个重要研究内容。但如只涉及到设计和选择测...
...氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态中间体回到稳定的基态时, 同时发射出 光子 (hM) , 利用发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体) 直接标记在 抗原 (化学发光免疫分析) 或 抗体 ( 免疫化学 发光分析) 上, 或酶作用于发光 底物 。 化学发光免疫分 析法 以标记方法的不同而分为两种: ...
酶免疫技术是以酶标记的抗体或抗原为主要试剂的方法,是标记免疫技术的一种。近年来标记免疫技术飞速发展,应用不同标记物,根据不同原理、不同技术建立起来的检测方法层出不穷,而方法的创建者往往给同类的方法以不同的名称。因此确知某一方法属于哪一类型,对该方法的正确理解有着重要意义。本节先叙述各种标记免疫技术的要点,然后介绍酶免疫技术的分类,这样可以对酶免疫技术和其他非...
如 急性胰腺炎 时,血清和尿中淀粉酶活性显著升高; 肝炎 和其它原因肝脏受损, 肝细胞坏死 或通透性增强,大量转氨酶释放入血,使血清转氨酶升高; 心肌梗塞时,血清乳酸脱氢酶和磷酸肌酸激酶明显升高; 当 有机磷农药中毒 时,胆碱酯酶活性受抑制,血清胆碱酯酶活性下降; 某些肝胆疾病,特别是 胆道梗阻 时,血清r-谷氨酰移换酶增高等等. 细胞衰老时会出现水分减少、...
...后漂洗液中加用酶漂洗来解决。最近,Wolf等(1987)建议插入确定长度的寡核苷酸至载体内产生cRNA分子,这种cRBA分子称为“寡核苷酸核酸探针”(oligoribo-probes)已被成功的用于原位杂交实验。 图20-2 示cDNA转录为cRNA,可标记以不同的标记物,然后与细胞中的mRNA相结合。Biotin(生物素),Au(金),digo-(地高辛)
酶免疫技术一般分成酶免疫组化技术和酶免疫测定两大类。酶免疫组化技术与荧光抗体技术相似,酶标记抗体与组织切片上的抗原起反应,然后与酶底物作用,形成有色沉淀物,可以在普通光学显微镜下观察。如酶作用的产物电子密度发生一定的改变,则可用电子显微镜观察,称为酶免疫电镜技术。 酶免疫测定根据抗原抗体反应后是否需要分离结合的与游离的酶标记物而分为均相(homogenous...
众所周知,肝脏是一个代谢很活跃的器官,每个肝细胞含有数千个线粒体(约1000-2000个),线粒体含有极为丰富的酶类,估计有70多种酶;近代酶组织化学能从形态学显示的有30多种。 酶的组织化学与酶的生化学不同之处在于,酶的组织化学是在保存组织和细胞完整的生活状态下,通过底物的一系列反应呈颜色反应;而酶的生化学反应大都是将组织(或细胞)捣碎制成匀浆(或血清),...
...度成正比。通过光电组合自动控制系统将消光度转换为电信号,即可得出光密度值(O、D值),进行定量分析比较。前述 荧光素 染色、酶和 核酸 组织化学染色、 多肽 和 蛋白质 免疫组化染色、 放射自显影 和 原位杂交 等标本,均可应用 显微分光光度计 做定量分析。 2、形态计量术 形态计量术(morphometry)是运用数学和 统计学 原理对组织和细胞进行二维和...
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