（一）质粒DNA的提取及鉴定 1． （1）将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到通气良好的15ml的试管中，接入一单菌落，于37℃剧烈振荡培养过夜。 （2）将1.5ml培养物倒入1.5ml离心管中，用台式离心机于4℃以12000g离心5min，将剩余的培养物贮存于4℃。 （3）吸尽培养液，使细菌沉淀尽可能干燥。 2．碱裂解法小量抽提质粒 （1）将细菌沉淀...
...布的载片孵育于稀释的RNA酶溶液中，37℃，1h。系列等级乙醇 脱水 ，70%，90%，100%乙醇各2min，空气干燥。 ②相当250ml的预杂交液（含70%甲酰胺，0.6×SSC配），70℃水浴。置载片于此预杂交液内2min以使靶DNA变性，如（1）经系列等级乙醇脱水，空气干燥。 ③DNA探针准备与变性 杂交液：10×SSC20% tRNA 10% 甲酰...
原位杂交免疫细胞化学技术的应用除在培养的离散细胞涂片和各种组织制片如恒冷箱冷冻切片、石蜡包埋切片外，又进一步扩展到染色体铺片和电镜水平。现分别予以介绍。
1.(美)J萨拇布鲁克，EF弗里奇，T曼尼阿蒂斯着，金科雁，黎孟枫等译，分子克隆实验指南，第二版，北京：科学出版社。1992 2.ThKohler ,D Labner,AK Rost ,et al.Quantiattion of mRNA by Polymerase ChainReaction (Nonradioactive PCRMethods ),Spr...
...聚核苷酸探针。cRNA和cDNA的常用标记物有 32 S、 32 P、 3 H等放射性核素和荧光素、生物素、地高辛等非放射性物质。组织学应用的原位杂交术主要是染色体原位杂交和细胞原位杂交。前者是研究遗传基因、抗原基因、受体基因、癌基因等在染色体上的定位与表达；后者是研究细胞某种蛋白质的基因转录物mRNA在胞质内的定位与表达（图1－7，1－12）。核酸分子杂交...
分子 生物学 是由生物化学、 生物 物理学、遗传学、微生物学、 细胞学 、以纛信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的，凝聚了不同专长的科学家的共同努力。它虽产生于上述各个学科，但已形成它独特的理论体系和研究手段，成为一个独立的学科。 生物化学与分子生物学关系最为密切。两者同在我国教委和科委颁布的一个级学科中，称为“生物化学与分子生物学”，但两者...
...echniques; Identification of Chinese crude drugs; Summarization; 【摘要】 DNA指纹图谱可从分子水平对中药材的种质进行准确的鉴定。文章介绍了随机扩增多态性DNA技术、限制性片段长度多态性分析技术、mRNA差异显示技术、微卫星DNA技术、单核苷酸多态性技术在中药品质鉴定的应用。 【英文摘要】 T...
易复性疝临床症状可因疝囊大小或有无并发症而异。基本症状是腹股沟区出现一可复性肿块，开始肿块较小，仅在病人站立、劳动、行走、跑步、剧咳或婴儿啼哭时出现，平卧或用手压时块肿可自行回纳，消失不见。一般无特殊不适，仅偶尔伴局部 胀痛 和 牵涉痛 。随着疾病的发展，肿块可逐渐增大，自腹股沟下降至阴囊内或大阴唇，行走不便和影响劳动。肿块呈带蒂柄的梨形，上端狭小，下端宽大...
...（8）2×SSC冲洗10min（1×SSC：0.15mol/l NaCl, 0.015mol/L 柠檬 酸钠）。 （9）取10μl含相应探针的杂交液滴于标本上，如果是cDNA探针则用前将探针于95℃水浴中保温10min，马上放入冰浴中冷却，然后再用。 （10）盖上22×22mm的硅化盖片或合适大小的蜡膜，入温盒43℃保温12～16h。 （11）4×SSC洗脱...
...32P标记 噬菌体 DNA，35S标记其蛋白质外壳，再用标记的噬菌体去感染培养的大肠杆菌，结果发现进入 细菌 体内，使细菌生长、繁殖发生变化的是32P标记的DNA，而不是35S标记的蛋白质，并且新繁殖生成的噬菌体不含35S，只含32P。1953年Watson和Crick创立的DNA双 螺旋结构 模型，不仅阐明了DNA 分子 的结构特征，而且提出了DNA作为...
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