从不同组织细胞或血细胞中提取DNA是进行基因诊断的先决条件。制备DNA的原则是既要将蛋白质、脂类、糖类等物质分离干净,又要保持DNA分子的完整。蛋白酶K的应用使这两个原则得到了保证。在提取DNA的反应体系中,SDS是离子型表面活性剂,主要作用是:(1)溶解膜蛋白而不破坏细胞膜;(2)解聚细胞中的核蛋白;(3)与蛋白质结合,使蛋白质变性而沉淀下来。蛋白酶K可将...
(一)DNA的二级结构?菜?螺旋结构模型(double helixmodel)
...n等在70年代应用载体效应过继转移实验,证明了在抗体形成过程中,有对载体特异的 细胞 和对半 抗原 特异的细胞,分别称为载体反应细胞和半抗原反应细胞。并进一步证明T细胞是载体反应细胞,对抗体产生起辅助作用。B细胞是半抗原反应细胞,是产生抗体的细胞,自此阐明了载体效应的 细胞学 基础。 载体-半抗原概念极其重要,它可解释为什么 低分子量 化合物 与体内载体 蛋...
DNA做为遗传物质的基本特点就是在细胞分裂前进行准确地自我复制(self??replication),使DNA的量成倍增加,这是细胞分裂的物质基础。1953年Watson和Crick提出DNA双螺旋结构模型指出,DNA是由二条互补的脱氧核苷酸链组成,所以一条DNA链上的核苷酸排列顺序是由图16-1双螺旋DNA的复制另一条决定的。这就说明DNA的复制是由原来存...
由于DNA提取方法的改善和DNA质量的提高,几乎所有基因分析的技术均可用于石蜡包埋组织,但目前分子 病理学 研究的常用方法是点杂交、Southern印迹杂交和多聚酶链反应(PCR)。 1.点杂交 鉴于包埋组织DNA有一定程度的降解,因而点杂交被认为是一种简便、快速和实用的方法,特别适用于较大样本的筛选。Dyall – smith等(1988)采用未经抽提的蛋...
...病研究的诸领域,为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类基因组并非人们想象的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突变和DNA甲基化类型改变等时有发生,这些改变对于基因表达和调控,以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义。 医院病理科档案中积存的大量石蜡包埋组织,是一个可靠的分子生物学研究的材料来源。在石蜡切片上进行原位杂交或原位PC...
肿瘤 患者的 免疫反应 是指 免疫细胞 与 肿瘤细胞 相互作用引起的一系列复杂反应。人体 抗肿瘤免疫 反应有 体液免疫 和 细胞免疫 两大类。两者相互配合,相互调节。在肿瘤免疫反应中一般以细胞免疫反应为主。 参加抗肿瘤免疫反应 细胞 有两大类:一类是能捕获和处理 肿瘤抗原 ,使 淋巴细胞 接触 抗原 ,并在 淋巴因子 作用下参与各种免疫反应的细胞。这类细胞主...
DNA和RNA统称为核酸,早在1868年就被瑞士年轻医生米歇尔发现,在真核细胞中,98%以上的DNA存在于细胞核,少量的DNA分布在线粒体中。RNA主要存在于细胞质中,占其总量的90%左右。细胞外液则无核酸存在。对于非细胞形态的病毒来说,或含有DNA,或只含有RNA,因此可按所含核酸类型的不同,将病毒分为DNA病毒与RNA病毒。 组成核酸的基本单位是单核苷酸...
现在提到的分子载体有的不是用于克隆某基因,而是作为外源基因进入受体细胞的运载工具。
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