...uence)，所得到的Cot曲线更为复杂。 图15－9 不同物种核酸的Cot曲线 DNA的变性和复性原理，现已在医学和生命科学上得到广泛的应用。如核酸杂交与 探针 技术， 聚合酶链反应 (polymerasechain reaction,PCR)技术等。 3.分子杂交：(hybridization) 不同来源的核酸变性后，合并在一处进行复性，这时，只要这些核...
序列标志 位点 (Sequence Tagged Sites，STS) STS是对以特定对 引物 序进行PCR特异 扩增 的一类 分子 标记的统称。通过设计特定的引物，使其与 基因组 DNA序列中特定结合位点结合，从而可用来扩增基因组中特定区域，分析其 多态性 。利用特异PCR技术的最大优点是它产生信息非常可靠，而不像RFLP和RAPD那样存在某种模糊性
...些 激素 和因子)的 生物合成 ，能体外实现，这对医学和 生物学 的发展具有划时代的意义。如 人胰岛素 、 干扰素 、 乙型肝炎疫苗 等已可用重组 DNA技术大规模生产。许多 临床诊断 用的特异性 基因探针 ，也可通过DNA重组技术的扩增而获得，从而使很多 遗传性疾病 (如 β-地中海贫血 等)及 乙型肝炎 等的诊断水平前进了一大步。试用重组DNA进行“ 基...
...A。 逆转录现在已成为一项重要的分子生物学技术，广泛用于基因的克隆和表达。从逆转录病毒中提取的逆转录酶已商品化，最常用的有AMV逆转录酶。利用真核Mrna3’末端存在一段聚腺苷酸尾，可以合成一段寡聚胸苷酸（oligo(dT)）用作引物，在逆转录酶催化下合成互补于mRNA的cRNA链，然后再用RNase H将mRNA消化掉，再加入大肠杆菌的DNA聚合酶I催化合...
...值得注意的是，DNA聚合酶不能自行 从头合成 DNA链，而必须有一个原有的多核苷酸链作为 引物 ，DNA聚合酶只能在引物的3′末端上逐步合成DNA链。由此可见，DNA链的合成方向是从5′端至3′端进行的。 无论在 原核细胞 或 真核细胞 中，均存在着多种DNA聚合酶，它们的性质不完全相同。目前认为，在真核细胞中，DNA聚合酶α在复制中起关键作用，而DNA聚合...
标记染色体 ：在 肿瘤细胞 内常见到结构异常的 染色体 ，如果一种异常的染色体较多地出现在某种 肿瘤 的细胞内，就称为标记染色体，可分为特异性和非特异性标记染色体两种。如 慢性粒细胞性白血病 中的 费城染色体 即Ph小体。特异性标记染色体是指经常出现于同一种肿瘤内的标记染色体
isotope labelling 化合物 中的原子被其 同位素 ( 放射性同位素 或稳定同位素)的示踪原子所取代的标记。 取代后化合物的理化性质差异不大，也称为理想标记。
...较，探针序列应与含靶序列的核酸杂交，而与非靶区域的同源性不能超过70%或有连续8个或更多的碱基的同源，否则，该探针不能用。 按上述原则选出的探针会增加成功的机会，选定后进行合成与标记，并摸索合适的杂交条件。方法是制备几张点有特异靶DNA和不相关DNA的膜，各膜分别在不同温度下与探针杂交，特异靶DNA杂交信号强而非特异DNA不产生任何杂交反应的就是最适杂交温度...
标记原子 1abe11ed atom 亦称示踪原子。是一种元素中天然含量较少或不含有的原子。示踪原子可以是 放射性 的或非放射性的 同位素 。将示踪原于引入一种 化合物 中，则后者称为示踪化合物或标记化合物。标记化合物常用于植物营养问题或 代谢 问题的研究，是一种非常有效的手段。
...嘧啶碱基发生光化学反应，加成到DNA中，去除小分子后，得到生物素标记核酸探针。此法可标记单链或双链DNA或RNA，及寡核苷酸。灵敏度与放射性探针相当。标记方法：取DNA或片段0.5μg加50μlTE（pH8.0）缓冲液中，再加入5μlg生物素- 补骨脂 素，溶解后，置365nm紫外光下直接照射20min，距离5cm，加等体积TE，移入用TE平衡的Sephad...
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