Angerer及其同事们首先应用RNA探针于原位杂交（见Cox et al 1984），核酸探针为单链的RNA分子，产生自具有质粒逆转录系统的cDNA克隆（图20-2）。由于它是单链的，不像双链的DNA探针，在溶液中不会再退火（reanneal），因此，较大百分比的探针可参与杂交反应，较cDNA探针的信号强。除此之外，在溶液中产生的cRNA-mRNA杂交体比...
荧光抗体是免疫荧光细胞化学的重要技术之一，制备高特异性和高效价的荧光抗体必须选用高质量的荧光素和高特异性高效价的免疫血清。
...类生、老、病死的绝大多数遗传信息，读出它将为疾病的诊断、新药物的研制和治疗法的探索带来革命性的变革。因而，在此人类生命新征途的大好形势下组建中药现代化工程系及其研究开发中心，为国家培养现代 化药 学人才，进而加快我国现代医药科学和经济增长步伐，这是何等地及时重要。 利用现代生物技术，首先能解决的是中药天然资源不足及栽培周期长、效益差的缺点。据统计，民间应用的...
...抗血清中不应含有针对标本中正常组织的抗体。一般需经纯化提取IgG后再作标记。作为标记的荧光素应符合以下要求：①应具有能与蛋白质分子形成共价健的化学基团，与蛋白质结合后不易解离，而未结合的色素及其降解产物易于清除。②荧光效率高，与蛋白质结合后，仍能保持较高的荧光效率。③荧光色泽与背景组织的色泽对比鲜明。④与蛋白质结合后不影响蛋白质原有的生化与免疫性质。⑤标记方...
...治疗不同疾病和相应证的具体途径，从而揭示经络现象的深层本质。 三、在中药品种鉴定研究中的应用 我国中药资源十分丰富，商品药材的种类繁多，经典的来源、性状、理化性质鉴定方法，并不能满足中药真伪优劣鉴别的需要，尤其是不能满足对如动物药材、道地药材、加工炮制的药材以及中药复方制剂组分鉴定等的需要。利用基因芯片技术可以通过对待检样品与标准样品杂交后进行荧光检测及结果...
免疫金银技术（Immunogold—sliver Technique）是在免疫金基础上发展的新兴的先进的免疫细胞化学检测技术，它比免疫荧光，免疫酶标技术有许多独特的优点。 1．制备方法简单，易行。 2．标记简单 抗体、凝集素、酶、SPA、激素等很容易通过物理吸附作用与胶体金颗粒相结合形成稳定的金标复合物。由于在标记过程中不需要经过任何化学方法交联，抗体的生物...
...石蜡切片及超薄切片，进行荧光显微镜、光学显微镜及透射电镜观察。所应用的免疫细胞化学技术包括免疫荧光、免疫酶标及免疫电镜，兹分述如下： （一）免疫荧光细胞化学技术的应用 自1938年超高压汞灯荧光显微镜问世后，Coon于1942年首先应用荧光素标记抗体检查 肺炎 球菌，为荧光抗体技术的发展奠定了基础。1961年Dixon开始在肾脏疾病中应用，对肾脏的免疫病理研...
...D比值（235/280）小于3时，制备酶标抗体的效果较好，大于3时，需经蒸馏或Sephadex G-10柱层析或活性碳吸附等处理，除去杂质后应用。其制备方法分一步法和两步法；基本原理相同，是使戊二醛的两个醛基之一与酶蛋白的赖氨酸结合，另一醛基与免疫球蛋白上的氨基结合，将酶连结于抗体上。 （1）一步法：将酶、抗体、戊二醛按一定比例混合，经透析除去标记物中剩余的...
荧光抗体是免疫荧光细胞化学的重要技术之一，制备高特异性和高效价的荧光抗体必须选用高质量的荧光素和高特异性高效价的免疫血清。
...结果：杂交阳性部位着蓝黑色。 组织处理及预杂交所用器皿需高温消毒，实验者需戴手套。 （三）酶促生物素标记cRNA探针的应用 基本方法和放射性标记cRNA探针同，所不同的是探针浓度为2.5μg/μl。显示探针反应步骤如下。 （1）用PBS冲洗粘附有切片的载片2×3min。根据情况也可用漂洗法。 （2）将载片浸入0.3%H 2 O 2 在PBS或甲醇内30min...
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