核酸内切酶 (endonuclease)在 核酸 水解酶 中,为可水解 分子 链内部 磷酸二酯键 生成 寡核苷酸 的酶,与 核酸外切酶 相对应。从对 底物 的特异性来看,可分为DNaseⅠ、DNaseⅡ等仅分解DNA的酶; 脾脏 RNase、RNaseT1等仅分解RNA的酶。如链孢霉(Neurospora)的 核酸酶 就是既分解DNA又分解RNA的酶。一般来...
...含30000~50000cpm/10μl 3 h cRNA)。 (5)杂交后冲洗,金网自杂交液中取出后立即用大量的2×SSC冲洗多次。RNA酶溶液(20μg/ml)室温冲洗,然后再用2×SSC室温冲洗,冲洗后梯度酒精脱水(70%,95%)空气干燥。 (6)浸入乳胶膜,应用L-4核乳胶液,水稀释4倍。浸膜后的金网,用胶带固定在载玻片上放在密封的黑色塑料盒内,4...
金标法是Faulk和Taylor(1971)提出的,并首先用于免疫电镜。它是利用胶体金在碱性环境中带有负电的性质,使其与抗体相吸附,从而将抗体标记。当用金标记的抗体与抗原反应时,在光镜水平胶金液呈现鲜艳的樱红色,不需加外进行染色。在电镜水平,金颗粒具有很高的电子密度,清晰可辨。因此,免疫电镜胶体金标记法近年来被成功地应用于生物学的各个方面,并取得了要喜的进展...
... 同上 生物素酰-e-氨基乙酸 化学合成法 同上 N-羟基丁二酰亚胺脂 酶标亲合素或酶标抗生物素抗体显色 生物素肼 化学合成法 酶标亲合素或酶标抗生物素抗体显色 酶 微过氧化物酶 直接法或合成法 直接底物显色或用酶标抗体+ 底物显色 碱性磷酸酯酶 直接法或合成法 同上 荧光素 罗丹明和FITC 合成法 直接荧光显微镜观察或酶标抗体+ 底物显色 化学发光标记物...
生物素- 补骨脂 素是另一种生物素光敏物质,在长波长紫外线照射下与嘧啶碱基发生光化学反应,加成到DNA中,去除小分子后,得到生物素标记核酸探针。此法可标记单链或双链DNA或RNA,及寡核苷酸。灵敏度与放射性探针相当。标记方法:取DNA或片段0.5μg加50μlTE(pH8.0)缓冲液中,再加入5μlg生物素- 补骨脂 素,溶解后,置365nm紫外光下直接照射...
...线 能量高。用它标记的探针自显影时间短,灵敏度高。32P的半寿期短,虽使用不方便,但为废弃物的处理减轻了压力。非放射性标记法有酶标法和化学物标记法。酶标方法与 免疫 测定ELISA方法相似,只是被标记的核酸代替了被标记的 抗体 ,事实上被标记的抗体也称为探针,现有许多商品是生物素、地高辛标记的。 血凝素 与生物素有非常高的亲和性,当血凝素标记上 过氧化物酶 ...
【别名】 2-巯基比啶-N-氧化物钠 ; 比硫酶净 ; 比硫钠 , 比硫酮钠 【 适应症 】 可用于治疗 体癣 、 股癣 、 足癣 等。 【用量用法】 涂搽患处:每日~3次,一般连续用药1~2周。 【规格】 霜剂:1%;稀醇溶液:0.5%~1%。
...库,再经前面介绍的筛选方法筛选特定基因克隆。用这种技术获得的DNA探针不含有 内含子 序列。因此尤其适用于 基因表达 的检测。 (三)RNA探针 RNA探针是一类很有前途的核酸探针,由于RNA是 单链 分子,所以它与靶序列的 杂交反应 效率极高。早期采用的RNA探针是细胞mRNA探针和病毒RNA探针,这些RNA是在细胞基因 转录 或 病毒复制 过程中得到标记...
金标法是Faulk和Taylor(1971)提出的,并首先用于免疫电镜。它是利用胶体金在碱性环境中带有负电的性质,使其与抗体相吸附,从而将抗体标记。当用金标记的抗体与抗原反应时,在光镜水平胶金液呈现鲜艳的樱红色,不需加外进行染色。在电镜水平,金颗粒具有很高的电子密度,清晰可辨。因此,免疫电镜胶体金标记法近年来被成功地应用于生物学的各个方面,并取得了要喜的进展...
在同一细胞组织标本上需要同时检查两种抗原时,要进行双重荧光染色,一般均采用直接法,将两种荧光抗体(如抗A和抗B)以适当比例混合,加在标本上孵育后,按直接法洗去未结合的荧光抗体,抗A抗体用异硫氰酸荧光素标记,发黄绿色荧光;抗B抗体用TMRITC或RB200标记,发红色荧光,可以明确显示两种抗原的定位。
所有搜索结果仅供参考,如需解决具体问题请咨询相关领域专业人士。