近几年来,在PCR基础上完善和发展起来的多种基因变异检测方法是基因分析和检测的一次技术革命。其中日本学者创建的PCR-SSCP(Single-Strand ConformationPolymorphism anal-ysis of PCR products)格外重要。它是指单链DNA分子在变性PAGE中电泳迁移率随其构象的改变而改变的性质。单链DNA分子的构...
...制备基因文库进行筛检,最后鉴定载体中插入DNA片段的特性等一系列技术,可以设法分离出目的基因或某一特定的DNA顺序。然后通过DNA核苷酸顺序分析可以弄清楚某些疾病的病因。比如,人体癌基因的分离和研究癌基因同原癌基因在DNA的结构与功能上的差别,对了解细胞癌变的机制起了很大的作用。分离目的基因或专一DNA顺序更常用的是制备分子杂交探针,通过Southern印迹...
(a retrospective study of 23 cases) 目的: 对23例卵巢颗粒细胞瘤的治疗及可能的预后因素进行回顾性分析,探讨手术、化疗、放疗在卵巢颗粒细胞瘤治疗中的意义。材料和方法:研究对象为北京协和医院1980年1月至1999年12月20年间收治的卵巢颗粒细胞瘤患者23例,患者的年龄范围为5-61岁,平均年龄38.4岁,主要临床表现为月...
一、放射免疫分析的基本试剂
(一)标准品 标准品是放射免疫分析法定量的依据,由于以标准品的量用来表示被涮物质的量,故标准品与被测物质应当化学结构一致并具有相同免疫活性。标准品作为定量的基准。应要求高度纯化。标准品除含量应具有准确性外,还应具备稳定性,即在合理的贮存条件下保持原来的特性。 按实验要求,将标准品用缓冲液配成含不同剂量的标准溶液,用于制作标准曲线。 (二)标记物 标记抗原应具...
(一)RIA的优点 放射免疫分析具有许多其它分析方法无可比拟的优点。它既具有免疫反应的高特异性,又具有放射性测量的高灵敏度,因此能精确测定各种具有免疫活性的极微量的物质。 1.灵敏度高一般化学分析法的检出极限为10 -3 ~10 -6 g,而RIA通常为10 -9 (毫微克,ng)、10 -12 g(微微克,pg),甚至10 -15 g(毫微微克,fg)、1...
(一)质量控制的目的和内容 放射免疫分析的质量控制实际上就是控制测定误差,监督测定结果。它包括两方面的内容:一方面对测定结果做精确分析;另一方面鉴定常规测定方法,对那些测定结果不好的方法加以改进,并建立新的测定方法。质量控制分四个方面: 1.在一个测定方法内产生的误差。 2.在同一实验室内不同方法之间产生的误差。 这两种情况属于内部质量控制。 3.用同一测定...
(一)标准品 标准品是放射免疫分析法定量的依据,由于以标准品的量用来表示被涮物质的量,故标准品与被测物质应当化学结构一致并具有相同免疫活性。标准品作为定量的基准。应要求高度纯化。标准品除含量应具有准确性外,还应具备稳定性,即在合理的贮存条件下保持原来的特性。 按实验要求,将标准品用缓冲液配成含不同剂量的标准溶液,用于制作标准曲线。 (二)标记物 标记抗原应具...
DNA限制性片段长度多态性(restricitionfragment length polymorphism, RFLPs)连锁分析法是指由于缺失、重排或碱基置换的结果,使DNA分子中原有的某种限制性内切酶的识别位点发生改变,或是消失或是增加,所以酶切后生成的DNA片段的长度也随之改变。这种DNA限制性片段长度的变化往往同某种疾病的连锁关系,因而可作为这种疾...
为了正确应用免疫细胞化学标记手段在 恶性淋巴瘤 诊断,分型等方面发挥更大的作用应注意下列问题:①免疫细胞化学在恶性 淋巴瘤 分析中应紧密结合组织学改变,有目的地选用高效、广谱的抗体,淋巴瘤常用标记抗体见表12-4。因为免疫细胞化学的结果受到多种因素的影响,可以出现假阳性或假阴性;②为了避免因抗体标记的局限性而造成漏诊,有条件的单位最好一次用同功能的几种抗体,...
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