脂蛋白(a)[Lipoprotein(a),Lp(a)]由Berg在1963年制备LDL抗体过程中发现,当时测定Lp(a)在北欧人群分布率为30%,目前采用更灵敏的方法已发现其几乎存在于所有人群中,只是在血浆的浓度差异极大,从小于1mg/dl到大于100mg/dl。更重要的是Lp(a)在血浆中的水平与 冠心病 密切相关,其结构与纤维酶原极其相似。Lp(α)上...
载脂蛋白分离纯化后,获得了所需要的纯品,该纯品纯度及其品种可通过下述方法进行鉴定。 一、免疫电泳法 免疫电泳法既可用于鉴定蛋白种类,又可鉴定其纯度。 制备1%的琼脂糖,以0.1mmol/L巴比妥缓冲液(0.05μ,pH8.6)为溶剂,制作一块约7×4cm的大小,厚度为0.2~0.3cm的琼脂糖凝胶,以 玻璃 板或薄膜为支持物,于凝胶正中打孔(直径0.2cm)...
血浆中蛋白质种类繁多,对各种单一蛋白进行快速而又特异的定量。目前公认的方法是免疫测定法,即利用其特异的抗体,采用测定抗原抗体复合物的方式定量。血浆(清)中载脂蛋白是以脂蛋白形式存在的少量蛋白,在解联剂作用下,使载脂蛋白从脂蛋白中分离出来,再利用相应的载脂蛋白抗体进行测定。 载脂蛋白的免疫测定方法很多,目前采用的方法各有其特点,所需条件也有差异,现将医学检验中...
1.用途:无脂蛋白血清(lipoprotein deficient serum,LPDS)主要用于LDL受体活性测定的细胞培养。 2.操作:常规采血,室温放置1~2h,以3kr/min离心10min,分离得到血清。向血清中按每1ml加0.33496g KBr,使其血清密度为d=1.215,或者按等体积加d=1.215的KBr液,按前述两方法铺在血清上面,按4...
...IDL部分。这些小鼠的甘油三酯无明显异常,提示存在有富含胆固醇的脂蛋白颗粒,类似于β-VLDL。动力学研究表明这种ApoE缺乏动物存在严重的脂蛋白清除障碍,完全证实了ApoE的受体结合功能。杂合子型的ApoE缺乏小鼠表现轻度降低的血浆ApoE水平,而其他脂蛋白水平正常,餐后脂血症时间轻度延长。由此可见,即使表达50%的ApoE基因也足以维持正常的脂蛋白代谢状...
在 人类 进化过程中,基因的DNA序列在逐渐演变。这种演变大都发生在氨基酸编码子以外的区域,称为“中性”变化,不导致临床疾病的发生。但是,基因的氨基酸编码区以及基因表达的调控区的DNA序列改变时有发生。导致蛋白质的合成量改变或基功能的异常。载脂蛋白结构基因或其调控区DNA序列的突变引起致 高脂血症 或早发 动脉粥样硬化 已大量见诸于医学文献。新的载脂蛋白基因...
大部分人体载脂蛋白基因的染色体定位采用了两种方法:DNA印迹法(Southern blotting);荧光标记原位杂交法(fluorescence insitu hybridization)。DNA印迹法主要是分析从人与老鼠或中国苍鼠体细胞杂交体中提取的DNA。如果人体某种载脂蛋白cDNA或基因DNA探针仅与含有特定人体染色体的体细胞杂交体DNA杂交,且不与...
抗原免疫动物产生的抗体是血清γ-球蛋白的一部分。抗体的理化性质及结构与γ-球蛋白相近似。γ-球蛋白是一组结构相似,但又有差异的蛋白质,通称为免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig),按其结构和免疫化学性质的差异,又可分为五类,分别称为IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。载脂蛋白抗体以IgG最为稳定。因载脂蛋白的体液中含量不同以及分离纯化的难易的差...
...区有11~71核苷酸序列的不同。Apo(a)基因的结构与血纤维蛋白溶酶原的基因结构相似(见图4-3A与图4-1B)。其中信号肽编码区100%的等同。其他区域的类似程度在75%~94%不等。这提示Apo(a)与血纤维蛋白溶酶原基因由同一个前体衍化而来。正是由于这个类同性,脂蛋白(a)不仅与脂类代谢有关。而且也参与血液凝固的机制。 图4-3 Apo(a)与血纤维...
...固醇主要分为低密度脂蛋白胆固醇(以下简称LDL),和 高密度脂蛋白胆固醇 (以下简称HDL),LDL高于正常是坏事,但HDL高于3.0是大大的好事,他是 脂质 的清道夫。 高密度脂蛋白 HDL可将血液中的多余的胆固醇转运到 肝脏 ,处理分解成 胆酸盐 ,通过胆道 排泄 出去,从而形成一条 血脂 代谢 的专门途径,也称“逆转运途径”。 2.低密度脂蛋白胆固醇(...
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