70年代以来,由于免疫组织化学方法的广泛应用,在技术方法上不断得以改进,涌现了一批新的技术方法,其特点为一些具有双价或多价结合力的物质如如植物凝集素(Lectin)、生物素(Biotin)和 葡萄 球菌A蛋白(Staphylococcal Protein A, SPA)等被应用于免疫细胞化学技术,从而建立了SPA—HRP法、ABC法、BRAB法和LAB法等。...
关于免疫金银细胞化学的原理、试剂配制和光镜显示技术在本书第五章 已作了较详尽的叙述。免疫金银细胞化学技术说可应用于电镜水平。一般用于包埋前染色。其主要操作步骤如下: (1)组织固定振动切片机切片10~30μm。 (2)人3%正常 羊血 清,含0.1%Triton X—100 的PBS孵育30min,以封闭非特异性结合部位 (3)1%硼氢化钠的PBS孵育30m...
(一)基本原理 染色体上基因位置分配的研究,又叫染色体图的研究,包括基因名称、基因在染色体的位置及与相邻基因的距离及其核酸序列的研究。研究基因图的方法包括家系的连锁分析法、体细胞杂交法、重组DNA技术和原位杂交法。果蝇的线形基因图和大肠杆菌、T 4 噬菌体两者的环状基因图都已绘成,目前正致力于 人类 基因图的绘制。人类基因约有5万~10万个,根据第八次国际人...
1.国内应用的外周血培养染色体技术 (1)原理:外周血染色体制备是目前应用最广泛的细胞遗传学诊断技术,亦是基本的实验技术,由于取材容易,培养过程比较简单,短期内可以得到结果,所以其实用价值很高。 血液中含有红、白两类细胞,它们均是处于未分裂的间期细胞。红细胞没有核,无分裂能力;白细胞类虽有细胞核存在,但是外周血中处于休止期。植物血球凝集素(简称PHA)能促使...
...连锁遗传性疾病的危险而需做迅速的性别确定时;(3)协助鉴别45,X/46,XY镶嵌和其它异常染色体的镶嵌类型;(4)当一雌性具有一Y染色体的杂交时,应检查其父母的血样品,因为在正常情况下有部分的雄性具有2个Y染色体。这里只叙述了性染色体在ISHH技术的应用,如用同样技术标记其它染色体也可能对其它遗传性疾病进行诊断,如Julien等(1986)曾应用染色体21...
...切片也可消除背景的银颗粒。但必须在显微镜下控制 脱水 时间,防止把阳性结果脱色。 (三)彩色显影背景过染的处理方法 彩色免疫金银法,在胶体金技术中是一个很大的突破,它的优点是结果鲜明,对比度好,但是在彩色显影过程中时间过长,背景可有一些着色,彩色显影的时间控制很重要。一旦过染可用以下方法处理。 (1)纯酒精滴到切片上3~5s,立即冲掉,水洗,充分地把酒精洗掉...
一、免疫荧光或免疫酶标技术在肾脏疾病中的应用的意义
在肾脏疾病时,免疫细胞化学技术主要应用于肾脏穿刺组织的检查,也可应用于血清或肾脏洗脱液及尿液的特殊检查,兹分述如下:
一、概述
...球及肾小管的分布部位及数量,以及确定其在细胞内之位置(胞浆内或胞核内)和与在上皮下或内皮下沉积之免疫复合物间的关系。目前并 可利用分子生物学技术鉴别乙肝病毒有无复制,从而深入探讨乙肝病毒相关性肾炎的发病机制。 3.研究肾小球内沉积之免疫复合物的组成成分及其形成过程 应用不同大小胶体金颗粒标记多种免疫球蛋白,以显示肾小球中沉积的电子致密物质(即免疫复合物)中各...
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