从不同组织细胞或血细胞中提取DNA是进行基因诊断的先决条件。制备DNA的原则是既要将蛋白质、脂类、糖类等物质分离干净,又要保持DNA分子的完整。蛋白酶K的应用使这两个原则得到了保证。在提取DNA的反应体系中,SDS是离子型表面活性剂,主要作用是:(1)溶解膜蛋白而不破坏细胞膜;(2)解聚细胞中的核蛋白;(3)与蛋白质结合,使蛋白质变性而沉淀下来。蛋白酶K可将...
Jo-1抗原是组氨酰tRNA合成酶在胞浆中以小分子核糖核蛋白(scRNPs)形式出现,分子量为50KD,它是氨酰tRNA合成酶之一。抗Jo-1抗体对 多发性肌炎 的诊断具有较强的特异性,是目前公认的多发性肌炎(PM)的血清标记抗体。
...制备抗 黑色素瘤 细胞的McAb,除用黑色素瘤细胞反应外,还应该用其它脏器的肿瘤细胞和正常细胞进行交叉反应,以便挑选肿瘤特异性或肿瘤相关抗原的单克隆抗体。②制备抗重组的细胞因子的单克隆抗体,应首先考虑是否与表达菌株的蛋白有交叉反应,其次是与其它细胞因子间有无交叉。 2.McAb的Ig类与亚类的鉴定一般在用酶标或荧光素标记的第二抗体进行筛选时已经基本上确定了抗...
肺出血-肾炎综合征又称抗基 膜性肾小球肾炎 , Goodpasture综合征 或Goodpasture病,可能系病毒感染和/或吸入某些化学性物质引起。它 是由抗基膜抗体导致的肾小球和肺泡壁基膜的严重损伤,临床表现为肺出血, 急进性肾小球肾炎 和血清抗肾小球基膜(GBM)抗体阳性 三联征 。多数患者病情进展 迅速,预后凶险。
1. 染色体异常 Turner’s综合征。 2.先天发育缺陷:卵巢不发育或先天缺陷。 3.自身免疫性疾病:卵巢产生自身免疫性抗体,常常与另一种自身免疫病同时存在,如 风湿性关节炎 ,甲状腺炎、 重症肌无力 等。有人用∑US法测定,发现 POF者均可测到卵巢与卵子的特殊抗体,其中抗卵巢抗体占47%,抗卵子抗体占47%,抗二者的抗体有69%。经免疫治疗后,二例妊...
核酸分子探针的制备首先需要获得所要的特异性核酸或其片段。可用以下方法制备: (1)直接分离基因核酸:即从基因组上直接用内切酶切下所需基因。 (2)化学合成基因核酸:即以单核苷酸为原料,以固相磷酸三酯法合成某一结构完全清楚,分子量较小的寡核苷核。 (3)酶促合成核酸:在真核细胞中获得特异的结构基因。常用方法是以mRNA为模板,利用逆转录酶合成单链cDNA,再以...
一、 抗体 产生的一般规律 当第一次用适量 抗原 给动物 免疫 ,需经一定 潜伏期 才能在 血液 中出现抗体,含量低,且维持时间短,很快下降,称这种现象为 初次免疫应答 。若在抗体下降期再次给以相同抗原免疫时,则发现抗体出现的潜伏期较初次应答明显缩短,抗体含量也随之上升,而且维持时间长,称这种现象为现次 免疫应答 或 回忆应答 。由于对抗体分子结构研究的进展...
细菌转化的方法多以Mendel和Higa(1970)的发现为基础,其基本方法是用冰预冷的CaCl 2 或多种2价阳离子等处理细菌,使之进入感受态得以转化。 用CaCl 2 制备新鲜或冷冻的大肠杆菌感受态细胞,常用于成批制备感受态细菌。本法适用于大多数大肠杆菌菌株,且迅速、重复性好。操作过程简述如下。 1.从37℃培养16~20h的新鲜平板中挑取一个单菌落(如...
一、目的要求 1.正确理解统计研究的三个基本步骤一搜集资料、整理资料、分析资料—和它们之间的关系。 2.学会拟制调查表,整理表的统计表的基本原则和方法。 3.重点学会如何对原始资料进行整理,并正确绘制图表。 二、内容、步骤 1.按下题要求自制调查卡片一份 某医师想观察胎盘娩出方式与人工 流产 史的关系,须要统计项目是人工流产史(流产胎次)和胎盘娩出方式(包括...
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