断裂—标记免疫电镜技术_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...界点干燥,喷镀铂—碳膜,次氯酸钠清洗复型,蒸馏水洗,捞于有Formvar 膜铜网上透射电镜观察。 (2)超薄切片法 步骤:①至⑤同临界点干燥法。 ⑥1%锇酸,室温固定2h,系列酒精或丙酮脱水,常规电镜包埋。 ⑦切半薄片,光镜定位合适的断裂部位,再切超薄切片,铀铅染色,透射电镜观察。 断裂标记法目前文献报告应用较多的是植物凝集素—胶体金免疫标记技术,常用的如 ...

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胶体金的特性和制备_《免疫学和免疫学检验》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...颗粒的大小。当然也可用分光光度计扫描λmax来估计金颗粒的粒径。结制备的胶体金最好作电镜观察,并选一些代表性的作显微摄影,可以比较精确地测定胶体金的平均粒径。 胶体金在洁净的玻璃器皿中可较长时间保存,加入少许防腐剂(如0.02%NaN 3 )可有利于保存。保存不当时会有细菌生长或有凝集颗粒形成。少量凝集颗粒并不影响以后胶体金的标记,使用时为提高标记效率可先低...

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胶体金_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...体系 指分数散相以小分子或离子状态分散着。这种溶液具有高度稳定性,无论放置多久,分散相颗粒都不会因重力而下沉,不会从溶液中分离出来。 (二)胶体分散体系 是指分散相颗粒在1~100nm之间的分散体系叫做胶体分散系。胶体溶液外观透明不浑浊,在普通显微镜下看不见它的分散相粒子,不易受重力影响与分散介质分离沉降,但其中的溶胶粒子有聚结变大的倾向,即具有聚结不稳定性...

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胶体金的制备方法_《实用免疫细胞与核酸》在线阅读_【中医宝典】

胶体金溶液的制备有许多种方法,其中最常用的是化学还原法,基本的原理是向一定浓度的金溶液内加入一定量的还原剂使金离子变成金原子。目前常用的还原剂有:白磷、乙醇、过氧化氢、硼氢化钠、抗坏血酸、 枸橼 酸钠、鞣酸等,下面分别介绍制备不同大小颗粒的胶体金溶液。

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胶体金颗粒直径测定_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

用预先处理好的覆有Formvar膜的镍网浸入胶体金溶液内,取现放在空气中干燥或37℃烤箱烤干。然后在透射电镜下观察,主要观察金颗粒的大小,符合不符合所需要的颗粒直径,金颗粒是否均匀一致,有无椭圆形及多角形金颗粒存在。理想的金颗粒是大小基本相等,均匀一致,无椭圆形及多角形的金颗粒存在,还可以拍片放大后测量金颗粒直径的大小。

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胶体金pH值的调整_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

胶体金与蛋白质的结合成功与否,取决于pH值,一般只有在蛋白质等电点(PI)略偏碱的条件下二者才能牢固地结合,因此,标记之前须将胶体金溶液的pH值调至待标记蛋白质的等电点略偏碱。需要提高胶体金的pH值时可用0.1molK 2 CO 3 ,需要降低胶体金的pH值时可用0.1n HCl。测定金溶液的pH可能损害pH测定计的探头,因此,一般用精密的pH试纸测定其pH...

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影响胶体金颗粒大小的因素_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...不均匀,速度太慢没有搅拌起来,造成了颗粒大小不等。制备量的多少,容器的大小,加热的时间等也影响胶体金颗粒的大小。制备了合格的胶体金以后,放在室温或4℃保存。避免低温冻存,因为冻存可导致胶体金凝集,破坏了胶体状态。胶体金在室温避光无灰尘的环境中可放置3个月左右。冰箱内半年左右。根据胶体金的性质,有不稳定和聚沉的可能性,因此,制备完毕后最好在20天以内进行标记。

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胶体金的制备方法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

胶体金溶液的制备有许多种方法,其中最常用的是化学还原法,基本的原理是向一定浓度的金溶液内加入一定量的还原剂使金离子变成金原子。目前常用的还原剂有:白磷、乙醇、过氧化氢、硼氢化钠、抗坏血酸、 枸橼 酸钠、鞣酸等,下面分别介绍制备不同大小颗粒的胶体金溶液。

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制备胶体金的准备_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...清洁液,然后每个玻璃器皿用洗洁剂洗3~4次,自来水冲洗掉洗洁剂,用蒸馏水洗3~4次,再用双蒸水把每个器皿洗3~4次,烤箱干燥后备用。通过此方法的处理玻璃器皿不需要硅化处理,而直接制备胶体金。也可用已经制备的胶体金溶液,用同等大不颗粒的金溶液去包被所用的玻璃器皿的表面,然后弃去,再用双蒸水洗净,即可使用,这样效果更好,因为减少了金颗粒的吸附作用。 (二)试剂的...

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