...—HCl/PBs 30~60min。 ③0.1~0.5mol/L氯化钠/PBs 30~60min。 ④PBS—BSA冲洗5min×3。 3.免疫标记与透射免疫电镜的原则及步骤基本相同。 免疫金银染色法举例(张留保等,1997) (1)血细胞以PBS—BSA冲洗5min×3。 (2)2%多聚甲醛—戊二醛混合液固定,4 ℃ ,1h (3)PBS或TBS反复冲洗5...
1.术前准备: (1)仔细检查病人,以确定是否适应症,有无禁忌。根据病情,确定处方。 (2)检查应用的药品、器材是否齐备,然后一一擦净,按次序排置好。 (3)对患者说明施术过程,解除其恐惧心理,增强其治疗信心。 2.患者体位:病人的体位正确与否,关系着拔罐的效果。正确体应使病人感到舒适,肌肉能够放松,施术部位可以充分暴露。一般采用的体位有以下几种 (1)仰卧...
拔罐的操作步骤一定要仔细检查病人,以确定是否适应症,有无禁忌。根据病情,确定处方。 1.术前准备: (1)仔细检查病人,以确定是否适应症,有无禁忌。根据病情,确定处方。 (2)检查应用的药品、器材是否齐备,然后一一擦净,按次序排置好。 (3)对患者说明施术过程,解除其 恐惧 心理,增强其治疗信心。 2.患者体位:病人的体位正确与否,关系着拔罐的效果。正确体应...
...)是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下: 图15-4双抗体夹心法测抗原示意图 (1)将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。 (2)加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。 (3)加酶标抗体:使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未...
(一)标准曲线的绘制 称取一定量硫酸铁铵[NH4Fe(SO4)2·12H2O]用蒸馏水溶解,加适量配制成含 Fe3+0.1lg·L-1的标准溶液,再稀释成含Fe3+0.025mg·L-1的操作溶液。 取25ml容量瓶6只,编号后分别加入操作溶液0.00,1.00,2.00,3.00,4.00及5.00ml,各加入10%NH4CL溶液2ml和10%磺基 水杨 ...
扫描免疫电镜技术可为研究细胞或组织表面的三维结构与抗原组成的关系提供可能性。
应用于电镜水平的免疫法,可分为包埋前染色和包埋后染色,由于包埋前染色对细胞膜的穿透性差,一般只用于细胞表面的抗原标记,如需穿透细胞膜,则需辅以冻融法或加入Triton X—100、皂素等活性剂,后者会加重细胞超威结构的破坏,因此,现较普遍采用包埋后染色,现分别介绍如下:
...增强细胞膜的穿透性,使标记抗体液进入细胞内。 2.免疫反应处理 常用包埋前染色,分直接法和间接法两种。在染色前,将组织切成约10~20μm厚的薄片。 (1)直接法:将薄片直接浸泡于标记抗体液中,室温或37℃作用1~2h或更长;缓冲液(有人提倡用冷缓冲液)浸漂,除去未结合的标记抗体溶液,然后转入常规双固定和电镜包埋。 (2)间接法: ①将组织切片浸于第一抗体液...
1.用以研究正常和病理状态下肾小球的超威结构成分及其变化 应用免疫酶标记的各种ECM成分的单克隆抗体,使用免疫电镜观察正常肾小球中各种结构成分如各型胶原、纤维连接蛋白、层粘连蛋白、硫酸肝素等在基底膜和系膜区的分布状况,并对比观察在病理情况下出现的变化。这有助于深入了解肾脏疾病的时超威结构成分的分布和数量变化。 2.探讨肾脏疾病的病源 应用免疫电镜可清晰显示 ...
铺板用的匀浆不宜过稠或过稀:过稠,板容易出现拖动或停顿造成的层纹;过稀,水蒸发后,板表面较粗糙。匀浆配比一般是硅胶G:水=1:2~3,硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。研磨匀浆的时间,根据经验来定,与空气湿度有关,一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断,越稠越难下滴。匀浆的稀稠除影响板的平滑外,也影响板涂层的厚度,进一步影响上样量。涂层薄,点样易过载;涂...
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