...放射性标记的成功,寡核苷酸探针在生物基础医学及临床学科领域中得到较为广泛的应用。 在原位杂交组织化学中应用寡核苷酸探针,其基本操作要点是相同的,如杂交温度在Tm-25℃,杂交孵育时间以过夜(16h左右)为佳。应用寡核苷酸探针在原位杂交组织化学技术中的成功与否主要决定于探针的设计,使有效配对率增加而错配(mismatch)减少。 (一)地高辛标记寡核苷酸探针的...
一、DNA探针的应用
...以下优点:①短的探针比长探针杂交速度快,特异性强。②可以在短时间内大量制备。③在合成中进行标记制成探针。④可合成单链探针,避免了用双链DNA探针在杂交中自我复性,提高杂交效率。⑤寡核苷酸探针可以检测小DNA片段,在严格的杂交条件下,可用于检测在序列中单碱基对的错配。 因此,寡核苷酸探针的研究,对于提高核酸杂交技术的特异性和敏感性,扩大应用范围有重要意义。 常...
寡核苷酸 ,是一类只有20个以下 碱基对 的短链 核苷酸 的总称(包括 脱氧核糖核酸 DNA或 核糖核酸 RNA内的核苷酸),寡核苷酸可以很容易地和它们的互补对链接,所以常用来作为 探针 确定DNA或RNA的结构,经常用于 基因 芯片、电泳、 荧光原位杂交 等过程中。 寡核苷酸合成的DNA(脱氧核糖核酸)可以用于链聚合反应,能放大确定几乎所有DNA的片段,在...
...以下优点:①短的探针比长探针杂交速度快,特异性强。②可以在短时间内大量制备。③在合成中进行标记制成探针。④可合成单链探针,避免了用双链DNA探针在杂交中自我复性,提高杂交效率。⑤寡核苷酸探针可以检测小DNA片段,在严格的杂交条件下,可用于检测在序列中单碱基对的错配。 因此,寡核苷酸探针的研究,对于提高核酸杂交技术的特异性和敏感性,扩大应用范围有重要意义。 常...
当 基因 的 突变 部位和性质已完全明了时,可以合成等基因特异的 寡核苷酸探针 (allele-specific oligonucleotide, ASO )用 同位素 或非 同位素标记 进行诊断。 探针 通常为长20bp左右的 核苷酸 。用于探测 点突变 时一般需要合成两种探针,一种与正常基因序列完全一致,能与之稳定地杂交,但不能与 突变基因 序列杂交;另...
当基因的突变部位和性质已完全明了时,可以合成等基因特异的寡核苷酸探针(allele-specific oligonucleotide,ASO)用同位素或非同位素标记进行诊断。探针通常为长20bp左右的核苷酸。用于探测点突变时一般需要合成两种探针,一种与正常基因序列完全一致,能与之稳定地杂交,但不能与突变基因序列杂交;另一种与突变基因序列一致,能与突变基因序列...
反义寡核苷酸 (antisense oligonucleotide, asON) 人工合成的,与靶 基因 或mRNA某一区段互补的 核酸 片断,可以通过 碱基 互补原则结合于靶基因/mRNA上,从而封闭基因的表达。 包括:反义DNA, 反义RNA, 其来源可有人工合成和体内表达两类。
反义寡核苷酸 (antisense oligonucleotide, asON) 人工合成的,与靶 基因 或mRNA某一区段互补的 核酸 片断,可以通过 碱基 互补原则结合于靶基因/mRNA上,从而封闭基因的表达。 包括:反义DNA, 反义RNA, 其来源可有人工合成和体内表达两类。
核苷酸 (nucleotide),一类由 嘌呤 碱或 嘧啶 碱、 核糖 或 脱氧核糖 以及 磷酸 三种物质组成的 化合物 。又称 核甙酸 。核苷酸也是构成 DNA (脱氧核糖核酸)和 RNA (核糖核酸)的单位,生物的 细胞 中都存在。 戊糖 与有机碱合成 核苷 ,核苷与磷酸合成 核苷酸 ,4种核苷酸组成 核酸 。核苷酸主要参与构成核酸,许多 单核苷酸 也具...
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