野生型噬菌体λDNA全长约50kb,上有65种限制酶酶切点,除ApaⅠ、NaeⅠ、NarⅠ、NheⅠ、Sna BⅠ、XbaⅠ和XhoⅠ等7种限制酶各有一个切点外,其余都多于2个。有些酶切点在λ增殖所必需的基因区域内。因此,噬菌体λ必须经过改造才能用作载体。现在用的λ载体大都除去了某种限制酶的酶切点。因此,作为载体的噬菌体λ都短于野生型。 噬菌体λ载体有两种类...
...臂一起包装成噬菌体,去感染大肠杆菌,并随噬菌体的溶菌繁殖而繁殖。现在广泛使用的λ噬菌体载体也是已作过许多人工改造的,主要的改造是:①设计去除λDNA上的一些限制性酶切点。这是因为λDNA较大,序列中的限制性酶切点过多,妨碍其应用。②在中段非必需区,替换插入某些标志基因如上述的可供蓝白筛选lacI-lacZ’序列,和多克隆 位点 等。由此可构建出两类λ噬菌体作...
近日,第四军医大学西京医院皮肤科刘玲硕士等在完成的一项国家自然科学基金资助课题中,采用细胞内PCR扩增抗体基因的方法,成功构建一库容量为3×106白癜风的噬菌体抗体库。该抗体库的建立,为进一步研究自身抗体在白癜风发生发展过程中的作用及其治疗提供了崭新的思路。 据介绍,白癜风是一种常见的皮肤色素脱失性疾病。近年来有研究表明,白癜风与自身免疫密切相关,其患者体内...
...体 。 跟别的病毒一样,噬菌体只是一团由 蛋白质 外壳包裹的遗传物质,大部分噬菌体还长有“尾巴”,用来将遗传物质注入宿主体内。超过95%已知的噬菌体以双螺旋结构的 DNA 为 遗传物质 ,长度由5个 碱基对 到500个千碱基对不等;余下的5%以 RNA 为遗传物质。正是通过对噬菌体的研究,科学家证实基因以DNA为载体。 整个噬菌体的长度由20纳米到200纳米...
噬菌体λ是最主要的一种载体。自从1974年以来,已用野生型λ改造和构建出一系列噬菌体载体。 噬菌体λ是温和噬菌体。基因组是长约50kb的双链DNA分子。在噬菌体λ颗粒中,DNA是线状双链分子带有单链的互补末端。末端长12个核苷酸,这称为粘性末端,简写COS。当噬菌体感染宿主细胞后,双链DNA分子通过COS而成环状。在感染早期,环状DNA分子进行转录。在此期间...
外源DNA片段末端的性质,以及质粒载体和外源DNA上限制酶切位点的性质决定了质粒或噬菌体与外源DNA连接反应的不同策略。 (一)外源DNA带有非互补突出端的片段 用两种不同的限制酶分别消化质粒等载体和外源DNA,可以产生带非互补突出端的片段,这是最容易连接的片段,如图24-1所示。 将已经连接外源DNA的细菌质粒载体转化感受态的大肠杆菌,然后在含有AP等抗生...
...中段序列,使其随左右臂一起包装成噬菌体,去感染大肠杆菌,并随噬菌体的溶菌繁殖而繁殖。现在广泛使用的λ噬菌体载体也是已作过许多人工改造的,主要的改造是:①设计去除λDNA上的一些限制性酶切点。这是因为λDNA较大,序列中的限制性酶切点过多,妨碍其应用。②在中段非必需区,替换插入某些标志基因如上述的可供蓝白筛选lacI-lacZ’序列,和多克隆位点等。由此可构建...
...有这种能力的通常为 溶原性 噬菌体。在特殊转导时,噬菌体 基因 的一部分组入其他DNA(转导片断),但作为其 代偿 ,对噬菌体 增殖 所必需的基因缺失者,称为缺陷型转导噬菌体(defective transducing phage),而非缺失者,称为活性型转导噬菌体(plaque-forming tra-nsducing phage),前者示现为λdg、λd...
噬菌体 分类 分类“噬菌体”的页面 此分类包含下列4个页面,共有4个页面。 单 单链噬菌体 原 原噬菌体 毒 毒性噬菌体 温 温和噬菌体
单链噬菌体 single stranded phage 含 单链 核酸 的 噬菌体 。其中包括以f2为代表的RNA噬菌体,以φX174为代表的球状DNA噬菌体,以fd为代表的纤维状DNA噬菌体。
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