免疫电泳 (immune electrophoresis)是将 琼脂 电泳和双向琼脂扩散结合起来,用于分析 抗原 组成的一种定性方法。先将抗原加到琼脂板的小孔内进行电泳,然后在琼脂板中央挖一横槽,加入已知相应的 免疫血清 ,两者经一定时间相互扩散后,就会在抗原、 抗体 比例最适处形成沉淀弧。根据沉淀弧的数量、位置和外形,参照已知抗原、抗体形成的电泳图,即可分...
免疫电泳技术是电泳分析与沉淀反应的结合产物。这种技术有两大优点,一是加快了沉淀反应的速度,二是将某些蛋白组分利用其带电荷的不同而将其分开,再分别与抗体反应,以此作更细微的分析。免疫电泳技术的种类很多,这里仅将常用的技术介绍如下。
免疫电泳为区带电泳与免疫双向扩散的结合,是由Grabar和Williams(1953)首先报道的。方法是先利用区带电泳技术将不同电荷和分子量的蛋白抗原在琼脂内分离开,然后与电泳方向平行在两侧开槽,加入抗血清。置室温或37℃使两者扩散,各区带蛋白在相应位置与抗体反应形成弧形沉淀线(图12-8)。根据各蛋白所处的电泳位置,可分为白蛋白区、球蛋白α1区、α2区、β...
免疫电泳技术是电泳分析与沉淀反应的结合产物。这种技术有两大优点,一是加快了沉淀反应的速度,二是将某些蛋白组分利用其带电荷的不同而将其分开,再分别与抗体反应,以此作更细微的分析。免疫电泳技术的种类很多,这里仅将常用的技术介绍如下。
火箭免疫电泳技术又称作单向电泳扩散免疫沉淀试验,它是由单向扩散发展起来的一项定量技术,实质上是加速度的单向扩散。在含抗体的琼脂板一端打一排抗原孔;加入待测标本后,将抗原置阴极端,用横距2~3mA/cm的电流强度进行电泳。抗原泳向阳极,在抗原抗体比例恰当处发生结合沉淀。随着泳动抗原的减少,沉淀逐渐减少,形成峰状的沉淀区,状似火箭(图12-11)。抗体浓度保持不...
对流免疫电泳实质上是定向加速度的免疫双扩散技术,其基本原理是:在琼脂板上打两排孔,左侧各孔加入待测抗原,右侧孔内放入相应抗体,抗原在阴极侧,抗体在阳极侧。通电后,带负电荷的抗原泳向阳极抗体侧,而抗体藉电渗作用流向阴极抗原侧,在两者之间或抗体的另一侧(抗原过量时)形成沉淀线(图12-10). 图12-10对流电泳结果示意图 ①Ag为阳性;②Ag为弱阳性;③Ag...
...全在液相中泳动的移动界面 电泳 ,开创了 电泳法 分离 蛋白质 的先例。 将待分离蛋白质溶液置于U形管中,其上覆以缓冲溶液,两端通以电流。在电泳时,各蛋白质向其相反 电极 的方向移动,通过光学折射系统,可察见各蛋白质移动的界面。但此法构造复杂,价格昂贵,难以普及使用。随后在固相支持体中进行带状电泳,又设计出 等电聚焦 电泳、 免疫电泳 等,电泳技术日臻完美,...
免疫固定电泳(immunofixationelectrophoresis,IFE)是Alper和Johnson(1969)推荐的一项有实用价值的电泳加沉淀反应技术。可用于各种蛋白质的鉴定。该法原理类似免疫电泳,不同之处是将血清直接加于电泳后蛋白质区带表面,或将浸有抗血清的滤纸贴于其上,抗原与对应抗体直接发生沉淀反应,形成的复合物嵌于固相支持物中。将未结合的游...
...用三层滤纸搭桥,抗原一端接阴极,另一端接阳极。 6.以电压12V/cm通电,用微量进样器准确加入等测血清5μl(1:20或1:30稀释)。 电泳2~3h后,关闭电源,置凝胶板于10.0%三氯醋酸液固定15~20min,取出胶板,在黑色背景灯光下量取沉淀峰高度,如图18-3所示。 图18-3 免疫火箭琼脂糖电泳图 7.计算 (1)查标准曲线。 (2)按下式计算...
免疫球蛋白是一类有抗体性的球蛋白,是机体特异性体液免疫反应的物质基础与执行单位。它的主要功能是与入侵的病原微生物发生免疫反应(调理、中和、制动、促进吞噬或溶细胞反应),保护机体免受病原体的侵害;清除体内自身抗原物质,参与免疫调控,保持机体内环境稳定。在外加直流电源的作用下,胶体微粒在分散介质里向阴极或阳极作定向移动,这种现象叫做电泳。利用电泳现象使物质分离,...
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