由于IEF法需大型设备，工作量较大，极大地限制了该法的临床应用。免疫印迹法为目前检测ApoE表型最常用方法。此法直接用血清（或血浆）作为样品，脱脂后进行IEF电泳，然后用特异性多克隆或单克隆抗体进行免疫印迹反应，根据黑色后图谱即可确定ApoE表型。此法比IEF法更省时、简便、准确。 1．仪器与试剂 电泳仪，垂直板式电泳槽，转移电泳槽，NC膜；主要试剂有：⑴3...
检测Apo（a）表型的方法中，以Utermann法或其改良法最为常用。这类方法先用SDS-PAGE分离Apo（a）异构体，然后用特异的多克隆或单克隆抗体作免疫印迹显示。 1．仪器与试剂 电泳仪，夹心式垂直板电泳槽及凝胶转移电泳槽，NC膜（孔径0.45μm,转移电泳用）；高分子量系列蛋白标准（MW67000～669000，Pharmacia产品）；ApoB10...
免疫印迹法 (Western blotting) 是一种将高分辨率 凝胶电泳 和 免疫化学 分析技术相结合的杂交技术。免疫印迹法具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点，是检测 蛋白质 特性、表达与分布的一种最常用的方法，如组织 抗原 的定性定量检测、 多肽 分子 的质量测定及 病毒 的 抗体 或抗原检测等。 免疫印迹法(immunobiotting tes...
ApoE表型检测即可以以VLDL为样品，又可以直接以血清（或血浆）为样品，通过IEF电泳分析、双向PAGE或结合免疫印迹法进行测定。 1．等电聚焦（IEF）：由于三种主要ApoE异构体E2、E3和E4的等电点（pⅠ）分别为5.89、6.02和6.68，E4比E3多一个正电荷，而E2比E3少一个正电荷。因此，可应用1EF检测这些异构体间电荷差异而确定不同Apo...
...%蔗糖的溶液60μl，并在室温下孵育30min，最后用氮气吹尽残存的乙醚，此即为IEF电泳的样品。③IEF电泳：按Menzel等（1983）法进行。垂直板PAG浓度为7.5%，内含1.6%pH4.0～6.5的两性电解质载体。电泳凝胶用0.2%CBBG250染色。脱色后至图像清晰后照像扫描。④ApoE表型判定：根据电泳图谱，依据E2、E3、E4各区带光密度比例...
...传易患因子。 4．ApoE表型与脑病 ApoE多态性与缺血性脑血管病（ICVD）关系密切。Pedro-Botet等研究发现ICVD组E4/3表型频率明显高于对照组，E3/3表型频率明显低于对照组，认为ε4基因可能是ICVD的一种遗传标记。而Couderc等采用病例一对照的方法研究认为ICVD组E3/3表型频率明显低于对照组，而E3/2明显高于对照组，认为ε2...
免疫印迹法（immunoblottingtest，IBT）亦称酶联免疫电转移印斑法（enzymelinkedimmunoelectrotransferblot，EITB），因与Southern早先建立的检测核酸的印迹方法Southernblot相类似，亦被称为Westernblot。免疫印迹法（图15-12）分三个阶段进行。第一阶段为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电...
体液免疫检测法 (assay of humoral immunity)，检测 体液免疫 功能的技术。分为体外检测和体内检测。体外 体液免疫检测法 包括 抗原抗体反应 、 体液 中各种可溶性免疫因素测定，体内检测为体液免疫测定技术。 体外体液免疫功能测定技术 包括两大类：抗原抗体反应和可溶性免疫 分子 测定。 抗原抗体反应 由于 抗体 主要存在于 血清 中，检...
细胞免疫检测法 (assays of cellular immunity)，检测参与 免疫应答 的各种 细胞 （即 免疫细胞 ）的数量和功能的方法。免疫细胞包括各类 白细胞 和它们的 前体细胞 。 血液 中的白细胞是成熟的免疫细胞的代表，可按形态分为 淋巴细胞 、 单核细胞 （在组织中转变成 巨噬细胞 ）、 嗜中性粒细胞 、 嗜酸性粒细胞 、 嗜碱性粒细胞 ...
...同位素标记探针的DNA片段所在部位将显示黑色的杂交带，基因的缺失或 突变 则可能导致带的缺失或位置改变。 分子杂交 是基因探测的基础，除了用印迹杂交外，还有 斑点杂交 法。即将DNA样品变性后直接点在 硝酸 纤维滤膜上，再与探针杂交，或者将 细胞 或 病毒 点在膜上， 菌落 或 菌斑 原位地吸附在膜上，经过变性处理，再进行杂交。斑点杂交多用于 病原体 基因，...
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