本法以VLDL为测定样品。首先利用超速离心机自血清中分离VLDL,一方面可去除血清杂蛋白的干扰,另一方面也可达到富集ApoE的作用,因ApoE主要存在于VLDL。 1.仪器与试剂 电泳仪,垂直板式电泳槽,超速离心机,光密度计,大培养皿;主要试剂有:①1.00g/mlNaBr与1.20g/ml NaBr溶液;②脱脂液为乙醇/乙醚混合液(3:1,V/V);③样品...
由于IEF法需大型设备,工作量较大,极大地限制了该法的临床应用。免疫印迹法为目前检测ApoE表型最常用方法。此法直接用血清(或血浆)作为样品,脱脂后进行IEF电泳,然后用特异性多克隆或单克隆抗体进行免疫印迹反应,根据黑色后图谱即可确定ApoE表型。此法比IEF法更省时、简便、准确。 1.仪器与试剂 电泳仪,垂直板式电泳槽,转移电泳槽,NC膜;主要试剂有:⑴3...
ApoE表型检测即可以以VLDL为样品,又可以直接以血清(或血浆)为样品,通过IEF电泳分析、双向PAGE或结合免疫印迹法进行测定。 1.等电聚焦(IEF):由于三种主要ApoE异构体E2、E3和E4的等电点(pⅠ)分别为5.89、6.02和6.68,E4比E3多一个正电荷,而E2比E3少一个正电荷。因此,可应用1EF检测这些异构体间电荷差异而确定不同Apo...
临床上对ApoE表型多态性的研究已有20多年的历史,许多研究表明,ApoE多态性与个体患 冠心病 (CHD)或脑卒中可能存在某种内在联系。1993年以来,又发现ApoE多态性与AD及老化有关。通过对不同人群ApoE表型频率分布差异、ApoE多态性对血脂水平的影响及在某些疾病状态时ApoE等位基因频率分布的系统深入研究,已取得许多研究成果。 1.人群ApoE表...
采用聚合酶链反应(PCR)限制性片段长度多态性(RFLP),即PCR-RFLP技术从基因水平检测ApoE基因多态性(基因型),操作简便、快速准确。 1.仪器与试剂 (1)仪器:电泳仪、基因扩增仪; (2)试剂:Taq DNA聚合酶、dNTPs、DNA参考物(pBR322DNA/HacⅢmarkers)、HhaⅠ,其余试剂均为分析纯。 2.实验方法 (1)引物...
...性,这些载脂蛋白可以以分子大小/电荷互不相同的多种形式存在。彼此互称异构体(isoform)。多态性反映了载脂蛋白结构的不均一性。 载脂蛋白表型(phenotype)指载脂蛋白的基因型与发育的环境相互作用而产生的个体的可观察到的性状。一般可分为纯合子(homozygous)与杂合子(heterozygous)两大类,分别由一种或几种异构体构成。通常应用等电聚...
...性,这些载脂蛋白可以以分子大小/电荷互不相同的多种形式存在。彼此互称异构体(isoform)。多态性反映了载脂蛋白结构的不均一性。 载脂蛋白表型(phenotype)指载脂蛋白的基因型与发育的环境相互作用而产生的个体的可观察到的性状。一般可分为纯合子(homozygous)与杂合子(heterozygous)两大类,分别由一种或几种异构体构成。通常应用等电聚...
表型 :又称性状,是 基因型 和环境共同作用的结果。指个体形态、功能等各方面的表现,如身高、 肤色 、 血型 、酶活力、药物耐受力乃至性格等等。 就是说个体外表行为表现和具有的行为模式。 表型,指能将生物体分类成独立类群的一系列特征。英文注释:A phenotype refers to a set of characteristics that can be...
表型 :又称性状,是 基因型 和环境共同作用的结果。指个体形态、功能等各方面的表现,如身高、 肤色 、 血型 、酶活力、药物耐受力乃至性格等等。 就是说个体外表行为表现和具有的行为模式。 表型,指能将生物体分类成独立类群的一系列特征。英文注释:A phenotype refers to a set of characteristics that can be...
...性,这些载脂蛋白可以以分子大小/电荷互不相同的多种形式存在。彼此互称异构体(isoform)。多态性反映了载脂蛋白结构的不均一性。 载脂蛋白表型(phenotype)指载脂蛋白的基因型与发育的环境相互作用而产生的个体的可观察到的性状。一般可分为纯合子(homozygous)与杂合子(heterozygous)两大类,分别由一种或几种异构体构成。通常应用等电聚...
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