...大部分限制性核酸内切酶识别DNA序列具有回文结构特征，切断的双链DNA都产生5’磷酸基和3’羟基末端。不同限制性核酸内切酶识别和切割的特异性不同，结果有三种不同的情况：①产生3’突出粘性末端（cohesive end）:以Eoor 为例：...
...、微量抗原抗体检测、SARS抗体药物鉴定、病毒检测及急性心肌梗死诊断标志物检测等多项实验，应用前景广泛。 相关链接： 生物传感器技术是近几十年内发展起来的一种新的传感器技术，是将生物活性材料（酶、蛋白质、DNA、抗体、抗原、生物膜等）与...
...短的重复顺序分别长16、17、32、33、37、41、62、64和376bp，但这些重复顺序几乎都共有一种“核心顺序”。“核心顺序”长10～15bp。如果人工合成很短的重复顺序作为DNA分子杂交的探针，同经限制性内切酶酶切的人体DNA作...
...进入含SDS和高浓度蛋白酶K（1mg/ml）的提取缓冲液加温孵育，然后进行苯酚和氯仿抽提。所得DNA虽不完整，但可被限制性内切酶切割，因而适于点杂交，印迹杂交等多种分子生物学实验。Dubeau等（1986）在上述方法上作了改进。首先通过组织...
...限制性内切酶作用部位（切点）也不同，这种酶切点只有4～6个核苷酸长度。因此来源于不同HLA单倍型的DNA可被一种内切酶切成不同长度的片段。在实际工作中，从细胞中提取基因组DNA（genomic DNA）的多态性比实际HLA-Ⅱ类抗原的多态性...
...外源DNA片段末端的性质，以及质粒载体和外源DNA上限制酶切位点的性质决定了质粒或噬菌体与外源DNA连接反应的不同策略。（一）外源DNA带有非互补突出端的片段用两种不同的限制酶分别消化质粒等载体和外源DNA，可以产生带非互补突出端的片段，...
...mg/ml；作用时间一般为2～4天，最长可达7天。蛋白酶K可分次加入，并注意不时震摇，使酶与组织充分接触。Koshiba等发现，利用Goelz等和Dubeau等提出的DNA提取方法，不能够得到令人满意的完整DNA。尿素和胍（guanidine...
...。经限制性内切酶消化后，乙醇固定组织DNA均显示由于重复DNA序列存在所产生的特征性卫星带，说明DNA被完成消化。Southern印迹杂交结果与冰冻组织一致。Sato 等（1990）用AMex方法处理组织，既可保存许多抗原成分，亦可使大...
...在各种自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮(SLE)等病人血清中常可检出抗脱氧核糖核酸(DNA)抗体，其中抗单链DNA(ssDNA)抗体可见于各种自身免疫病和结缔组织病人血液中，故无多大诊断特异性。但抗双链DNA(dsDNA)抗体主要见于...
...以12000g离心5min。（8）小心吸尽上清液，将离心管倒置于一张纸巾上，再将附于管壁的液滴除尽。（9）用75%乙醇于4℃洗涤DNA，同上离心去上清真空抽干。（10）加50μl的1×TE（含20μg/ml无DNA酶的胰RNA酶），振荡，...
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