非同位素标记物很多例如：生物素（biotin），地高辛（Digoxigenin），汞（mercury），溴（bromine）和碱性磷酸酶等，其中目前应用最多的是生物素和地高辛。将此法与免疫组化PAP法或ABC法联合使用，能成功地显示一些神经肽mRNA和神经肽的共存与共同分布。向正华等发现碱性磷酸酶抗地高辛抗体是经 木瓜 蛋白酶处理的，只有抗体的Fab段没有F...
...（6）PBS冲洗2×3min。 （7）0.25%乙酸酐（0.1mol/L 三乙醇胺配）10min。 （8）2×SSC冲洗10min。 （9）杂交：如是cDNA探针用前需进行变性处理，载片法时将切片在空气中晾干，加含探针的杂交液10μl于切片上，盖上22×22mm的硅化盖片或相当大小看蜡膜， 3 H标记探针每10μl杂交液含1×10 5 cpm探针， 32 P...
...于2×SSC内（应用0.1n NaOH调整至pH12），室温，2min。 （3） 脱水 ，以70%和95%酒精各冲洗3次，空气干燥。 （4）杂交，金网覆于平面 玻璃 皿（ Petri dish）内的杂交液滴上，每滴约10～15μl，将此小碟置于盛于杂交缓冲的大塑料盒内，保持湿润，在60～65℃孵育4～24h。 杂交液的配制：6×SSC或6×TNS（1×TNs...
原位杂交 （in situ hybridization） 将标记的 核酸 探针 与 细胞 或组织中的核酸进行杂交，称为原位杂交！ 使用DNA或者RNA探针来检测与其互补的另一条链在 细菌 或其他 真核细胞 中的位置。 1.以 菌落原位杂交 为例 ： 对分散在若干个 琼脂 平板上的少数 菌落 （100-200）进行克隆筛选时，可采用本方法。将这些菌落归并到一个...
原位杂交技术 (In situ hybridization，ISH)是 分子 生物学 、 组织化学 及 细胞学 相结合而产生的一门新兴技术，始于20世纪60年代。1969年国耶鲁大学的Gall等(1969)首先用爪蟾 核糖体 基因探针 与其 卵母细胞 杂交，将该 基因 进行定位，与此同时Buongiorno—Nardelli和Amaldi等(1970)相继利...
荧光原位杂交 方法是一种 物理图谱 绘制方法，使用 荧光素 标记 探针 ，以检测探针和分裂中期的 染色体 或 分裂间期 的 染色质 的杂交。 荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)是在20世纪80年代末在 放射性 原位杂交技术 的基础上发展起来的一种非放射性 分子 细胞遗传技术,以 荧光标记 取代 同...
自1969年以来，我们高兴的看到原位杂交免疫细胞化学技术已从分子生物学的一个分支发展成为生命科学的有效的研究方法。在原位杂交免疫细胞化学发展过程中两个关键性的突破是核酸探针制备的标记物的改进。核酸探针由克隆的核酸探针发展到无克隆的合成的寡核苷酸探针；从放射性同位素标记到非放射性标记。令人可喜的是，这一技术还处于不断的改进和更新的过程中。
自1969年以来，我们高兴的看到原位杂交免疫细胞化学技术已从分子生物学的一个分支发展成为生命科学的有效的研究方法。在原位杂交免疫细胞化学发展过程中两个关键性的突破是核酸探针制备的标记物的改进。核酸探针由克隆的核酸探针发展到无克隆的合成的寡核苷酸探针；从放射性同位素标记到非放射性标记。令人可喜的是，这一技术还处于不断的改进和更新的过程中。
1961年Hall开拓了液相核酸杂交技术的研究，其基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基顺序，通过碱基对之间非共价键的形成，出现稳定的双链区，形成杂交的双链。自此以后，由于分子生物学技术的迅猛发展，特别是70年代末到80年代初，分子克隆、质粒和噬菌体DNA的构建成功，核酸自动合成仪的诞生，大大丰富了核酸探针的来源，新的核酸分子杂交类型和方法不断涌现。按其...
自1969年以来，我们高兴的看到原位杂交免疫细胞化学技术已从分子生物学的一个分支发展成为生命科学的有效的研究方法。在原位杂交免疫细胞化学发展过程中两个关键性的突破是核酸探针制备的标记物的改进。核酸探针由克隆的核酸探针发展到无克隆的合成的寡核苷酸探针；从放射性同位素标记到非放射性标记。令人可喜的是，这一技术还处于不断的改进和更新的过程中。
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