质粒 （plasmid）是 细菌 或 细胞 染色质 以外的，能自主复制的，与细菌或细胞 共生 的遗传成分。其特点如下： ①是染色质外的双链共价闭合环形 DNA （covalentlyclosed circuar DNA,cccDNA），可自然形成 超螺旋结构 ，不同质粒大小在2-300kb之间，＜15kb的小质粒比较容易分离 纯化 ，＞15kb的大质粒则不易...
质粒 (plasmid)， 染色体 外能进行自主复制的 遗传 单位。包括 共生生物 、 真核生物 的 细胞器 和 细菌 细胞 中染色体以外的单纯的 脱氧核糖核酸 ( DNA ) 分子 。这个名词是 J.莱德伯格在1952年提出的，不过现在习惯上已用来专指细菌、 酵母菌 和 放线菌 等 生物 中染色体以外的单纯的 DNA分子。某些既能独立地存在于 细胞质 中又...
质粒（plasmid）是细菌或细胞染色质以外的，能自主复制的，与细菌或细胞共生的遗传成分。其特点如下： ①是染色质外的双链共价闭合环形DNA（covalentlyclosed circuar DNA,cccDNA），可自然形成超螺旋结构，不同质粒大小在2-300kb之间，＜15kb的小质粒比较容易分离纯化，＞15kb的大质粒则不易提取。 ②能自主复制，是能独...
外源DNA片段末端的性质，以及质粒载体和外源DNA上限制酶切位点的性质决定了质粒或噬菌体与外源DNA连接反应的不同策略。 （一）外源DNA带有非互补突出端的片段 用两种不同的限制酶分别消化质粒等载体和外源DNA，可以产生带非互补突出端的片段，这是最容易连接的片段，如图24-1所示。 将已经连接外源DNA的细菌质粒载体转化感受态的大肠杆菌，然后在含有AP等抗生...
所谓 穿梭质粒 是指一类人工构建的 具有两种不同 复制起点 和 选择标记 ，因而可以在两种不同类群 宿主 中存活和复制的 质粒 载体。此概念不仅用于不同的微生物菌群之间，也可以推广到 真核生物 表达载体 的构建， 如用于 枯草 的pBE2、 酵母 的pPIC9K、哺乳动物表达载体pMT2 和用于植物细胞的Ti 质粒 。这些穿梭质粒不仅可以在 大肠杆菌 中复制...
质粒 具有稳定可靠和操作简便的优点。如果要克隆较小的DNA片段(＜10kb)且结构简单,质粒要比其它任何载体都要好。在质粒载体上进行克隆,从原理上说是很简单的，先用 限制性内切酶 切割质粒DNA和目的DNA片段, 然后体外使两者相连接, 再用所得到 重组质粒 转化 细菌 ,即可完成。但在实际工作中, 如何区分插入有外源DNA的重组质粒和无插入而自身环化的载体...
穿梭载体 (shuttle vector)是指含有两个 亲缘关系 不同的 复制子 ，能在两种不同的生物中复制的。例如既能在 原核生物 中复制,又能在 真核生物 中复制的载体.这类载体不仅具有 细菌 质粒 的复制原点及 选择标记 基因 ,还有真核生物的 自主复制序列 (ARS)以及选择标记性状,具有多克隆 位点 .通常穿梭载体在细菌中用于克隆, 扩增 克隆的基...
克隆载体 （Cloning Vector）：通常采用从 病毒 、 质粒 或高等生物 细胞 中获取的DNA作为克隆载体，在载体上插入合适大小的外源DNA片段，并注意不能破坏载体的自我复制性质。将 重组 后的载体引入到 宿主 细胞中，并在宿主细胞中大量繁殖。常见的载体有质粒， 噬菌粒 ， 酵母 人工 染色体 。 对载体的要求：①能在宿主细胞中复制繁殖，而且最好要...
表达载体 （Expression vectors）就是在 克隆载体 基本骨架的基础上增加表达元件（如 启动子 、RBS、 终止子 等），是目的 基因 能够表达的载体。如表达载体pKK223-3是一个具有典型表达结构的 大肠杆菌 表达载体。其基本骨架为来自pBR322和pUC的 质粒 复制起点 和 氨苄青霉素 抗性基因。在表达元件中，有一个杂合tac强启动子和...
...tro ）中。可应用于基础研究、 基因 疗法 或 疫苗 。 可供利用的病毒可分为 逆转录病毒 、慢病毒与 腺病毒 。 1 .分为： 噬菌体 载体、杆状 病毒载体 、动物病毒载体、植物病毒载体 2 . 优点： 转导 效率高、复杂的装配过程由细胞完成、不同病毒载体具有不同表达特点 3 .根据病毒载体在 主细胞 中的存在情况分为瞬时表达病毒载体和稳定表达病毒载体 ...
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