外源DNA片段末端的性质，以及质粒载体和外源DNA上限制酶切位点的性质决定了质粒或噬菌体与外源DNA连接反应的不同策略。 （一）外源DNA带有非互补突出端的片段 用两种不同的限制酶分别消化质粒等载体和外源DNA，可以产生带非互补突出端的片段，这是最容易连接的片段，如图24-1所示。 将已经连接外源DNA的细菌质粒载体转化感受态的大肠杆菌，然后在含有AP等抗生...
野生型噬菌体λDNA全长约50kb，上有65种限制酶酶切点，除ApaⅠ、NaeⅠ、NarⅠ、NheⅠ、Sna BⅠ、XbaⅠ和XhoⅠ等7种限制酶各有一个切点外，其余都多于2个。有些酶切点在λ增殖所必需的基因区域内。因此，噬菌体λ必须经过改造才能用作载体。现在用的λ载体大都除去了某种限制酶的酶切点。因此，作为载体的噬菌体λ都短于野生型。 噬菌体λ载体有两种类...
噬菌体 （phage）是 感染 细菌 的一类 病毒 ，有的噬菌体 基因组 较大，加入λ噬菌和T噬菌体等；有的则较小，如M13、f1、fd噬菌体等。用感染 大肠杆菌 的λ噬菌体改造成的载体应用最为广泛。 λ噬菌体由头和尾构成，其基因组是长约49kb的线性双链 DNA 分子 ，组装在 头部 蛋白质 外壳内部，其序列已被全部测出。λ噬菌体感染时，通过 尾管 将基因...
最常用的单链噬菌体载体是M13和它的改建噬菌体。M13是丝状噬菌体，有长约6500个核苷酸的闭环DNA基因组。M13附着在大肠杆菌的F性菌毛上，所以它们只能感染雄性细菌，即F’或Hfr细菌。当噬菌体进入细菌细胞后，单链的噬菌体DNA转变成双链复制型（RF）。从细胞中分离的RF可用作克隆双链DNA的载体。当每个细菌细胞里 积聚 了200到300份RF型拷贝时，...
噬菌体（phage）是感染细菌的一类病毒，有的噬菌体基因组较大，加入λ噬菌和T噬菌体等；有的则较小，如M13、f1、fd噬菌体等。用感染大肠杆菌的λ噬菌体改造成的载体应用最为广泛。 λ噬菌体由头和尾构成，其基因组是长约49kb的线性双链DNA分子，组装在头部蛋白质外壳内部，其序列已被全部测出。λ噬菌体感染时，通过尾管将基因组DNA注入大肠杆菌，而将其蛋白质外...
噬菌体λ是最主要的一种载体。自从1974年以来，已用野生型λ改造和构建出一系列噬菌体载体。 噬菌体λ是温和噬菌体。基因组是长约50kb的双链DNA分子。在噬菌体λ颗粒中，DNA是线状双链分子带有单链的互补末端。末端长12个核苷酸，这称为粘性末端，简写COS。当噬菌体感染宿主细胞后，双链DNA分子通过COS而成环状。在感染早期，环状DNA分子进行转录。在此期间...
噬菌体 是 病毒 的一种，其特别之处是专以 细菌 为宿主，较为人知的噬菌体是以 大肠杆菌 为寄主的 T4型噬菌体 。 跟别的病毒一样，噬菌体只是一团由 蛋白质 外壳包裹的遗传物质，大部分噬菌体还长有“尾巴”，用来将遗传物质注入宿主体内。超过95%已知的噬菌体以双螺旋结构的 DNA 为 遗传物质 ，长度由5个 碱基对 到500个千碱基对不等；余下的5%以 RN...
温和噬菌体 或称 溶源性噬菌体 ，指噬菌体 感染 细胞 后，将其 核酸 整合（附着）到 宿主 的核DNA上，并且可以随宿主DNA的复制而进行同步复制，在一般情况下，不引起宿主细胞裂解。 噬菌体侵染宿主后，并不 增殖 ，裂解，而与宿主DNA结合，随宿主DNA复制而复制，此时细胞中找不到形态上可见的噬菌体，这种噬菌体称为温和性噬菌体。含有温和性噬菌体的 细菌 称...
根据与 宿主 菌的相互关系， 噬菌体 可分成两种类型：一种是能在宿主菌细胞内复制 增殖 ，产生许多 子代 噬菌体，并最终裂解 细菌 ，称为毒性噬菌体（virulent phage）。另一种是噬菌体 基因 与宿主菌 染色体 整合，不产生子代噬菌体，但噬菌体DNA能随细菌DNA复制，并随细菌的分裂而 传代 ，称为 温和噬菌体 （temperate phage）或...
单链噬菌体 single stranded phage 含 单链 核酸 的 噬菌体 。其中包括以f2为代表的RNA噬菌体，以φX174为代表的球状DNA噬菌体，以fd为代表的纤维状DNA噬菌体。
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