Kbaffan等（1986）首先创立了蓝色荧光素标记和染色技术，可进行双标记或多标记。 （1）取7-氨基-4-甲基香豆素（7-amino-4-methyl coumarin, AMC）260μg溶于二甲亚砜25μl中。 （2）将上液加入10ml IgG的 巴比妥缓冲液（0.5mol/L,pH8.5,内含50～100mg IgG）中，室温反应2h，过Sepha...
荧光素 是具有光致荧光特性的染料， 荧光染料 种类很多 种类 目前常用于标记 抗体 的荧光素有以下几种。 异硫氰酸荧光素 (fluorescein isothiocyanate, FITC) FITC纯品为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水和 酒精 溶剂。有两种 异构体 ，其中异构体Ⅰ型在效率、稳定性与 蛋白质 结合力等方面都更优良。FITC分子量为389.4，...
荧光素 是具有光致荧光特性的染料， 荧光染料 种类很多 种类 目前常用于标记 抗体 的荧光素有以下几种。 异硫氰酸荧光素 (fluorescein isothiocyanate, FITC) FITC纯品为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水和 酒精 溶剂。有两种 异构体 ，其中异构体Ⅰ型在效率、稳定性与 蛋白质 结合力等方面都更优良。FITC分子量为389.4，...
1．Marsshall 氏法 （1）材料：抗体球蛋白溶液、0.5mol/l pH9.0碳酸盐缓冲液、无菌生理盐水、异硫氰酸荧光素、1%硫柳汞水溶液、三角烧瓶（25～50ml）、冰及冰槽（或1000ml烧杯）、电磁搅拌器、灭菌吸管、透析袋、玻棒、棉线及烧杯（500ml）、pH7.2或8.0的0.01mol/L PBS等。 （2）方法及步骤： ①抗体的准备：取适...
以荧光物标记 抗体 进行 抗原 定位的技术。 荧光抗体技术 在临床检验上已用作 细菌 、 病毒 和 寄生虫 的检验及 自身免疫病 的诊断等。在细菌学检验中主要用于菌种的鉴定。 标本 材料可以是 培养物 、 感染 组织、病人分泌 排泄物 等。本法较其他鉴定细菌的 血清学 方法速度快、操作简单、敏感性高，但在细菌实验诊断中，一般只能作为一种补充手段使用，而不能代...
1．巯基化藻红蛋白（phycoerthrin PE）的制备，600μl的15.5mg/ml盐酸巯醇亚胺（iminothiolane hydrochloride）加到1.2ml的3.6mg/ml的PE中，和1.2ml PB、pH6.8 混合，装入透析袋置入50mmol/l pH6.8 PB中透析，4℃过夜，再换用pH7.5PB透析6h。每个PE分子中可结合8个...
用 荧光素 、 同位素 或 酶标记 抗体 或 抗原 ，用于抗原或抗体检测是目前广泛应用的敏感、可靠的方法。上述三种常用的 标记物 与抗原或抗体 化学 连接之后不改变后者的 免疫 特性。本方法可用于定性、定量或定位检测。 1． 免疫荧光技术 免疫荧光技术（immunofluorescencetechni）是用化学方法使荧光素标记的抗体（或抗原）与组织或 细胞 ...
（一）抗体的荧光素标记 用于标记的抗体，要求是高特异性和高亲和力的。所用抗血清中不应含有针对标本中正常组织的抗体。一般需经纯化提取IgG后再作标记。作为标记的荧光素应符合以下要求：①应具有能与蛋白质分子形成共价健的化学基团，与蛋白质结合后不易解离，而未结合的色素及其降解产物易于清除。②荧光效率高，与蛋白质结合后，仍能保持较高的荧光效率。③荧光色泽与背景组织的...
荧光抗体是免疫荧光细胞化学的重要技术之一，制备高特异性和高效价的荧光抗体必须选用高质量的荧光素和高特异性高效价的免疫血清。
用荧光素、同位素或酶标记抗体或抗原，用于抗原或抗体检测是目前广泛应用的敏感、可靠的方法。上述三种常用的标记物与抗原或抗体化学连接之后不改变后者的免疫特性。本方法可用于定性、定量或定位检测。 1．免疫荧光技术 免疫荧光技术（immunofluorescencetechni）是用化学方法使荧光素标记的抗体（或抗原）与组织或细胞中的相应抗原（或抗体）结合，进行定性...
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