(一) 醋酸纤维素 薄膜电泳 醋酸纤维素是提纤维素的 羟基 乙酰 化形成的纤维素 醋酸 酯。由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。这种薄膜对 蛋白质 样品吸附性小,几乎能完全消除纸电泳中出现的“拖尾”现象,又因为膜的亲水性比较小,它所容纳的 缓冲液 也少,电泳时电流的大部分由样品 传导 ,所以分离速度快,电泳时间短,样品用量少,5μg的蛋白质可得到满意的分离...
在实际工作中常采用琼脂糖凝胶电泳。一般情况下先在电泳缓冲液或凝胶中加1%溴化乙锭(EB)(每100ml加100μl),然后将已经制备好的1%~2%琼脂糖凝胶(用电泳缓冲液配制)放入电泳槽内,加入待测样品10μl,同时用分子量标准品作标记。琼脂糖浓度应按分离DNA片段的大小进行选择,一般用1.5%~2%,电泳电压75V,待样品进行凝胶内距胶末端1cm时,切断电...
(一)醋酸纤维素薄膜电泳 醋酸纤维素是提纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯。由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。这种薄膜对蛋白质样品吸附性小,几乎能完全消除纸电泳中出现的“拖尾”现象,又因为膜的亲水性比较小,它所容纳的缓冲液也少,电泳时电流的大部分由样品传导,所以分离速度快,电泳时间短,样品用量少,5μg的蛋白质可得到满意的分离效果。因此特别适合于病理情...
1.原理 血清脂蛋白x的组成中磷脂占66%,蛋白质仅占6%,在电场中因电荷少,选择电渗大小合适的琼脂为电泳支持物,则LpX向阴极移动,而其他蛋白质向阴极移动,从而达到分离的目的。用免疫沉淀法或聚阴离子沉淀法使其在琼脂板上沉淀,对于LpX阳性的血清可以在加样孔的阴极端见到白色沉淀带。 2、试剂 巴比妥缓冲液500mmol/L:pH8.6,离子强度0.05。 1...
电泳 (electrophoresis),荷电颗粒或 分子 在电场中的泳动。1927年A.蒂塞利乌斯设计完全在液相中泳动的移动界面 电泳 ,开创了 电泳法 分离 蛋白质 的先例。 将待分离蛋白质溶液置于U形管中,其上覆以缓冲溶液,两端通以电流。在电泳时,各蛋白质向其相反 电极 的方向移动,通过光学折射系统,可察见各蛋白质移动的界面。但此法构造复杂,价格昂贵,...
中药有效成分的分析有其特殊的复杂性, 首先是中药品种繁多, 不同品种间活性成分的含量相差悬殊; 其次中药有效成分受产地、栽培、生长环境和采收季节等多种因素的影响。 用于中药成分分析的方法很多, 其中HPLC 最常用。但用HPLC 进行中药成分分析常遇到一些问题,一是分析时间长、分离效率低, 即使采用梯度洗脱技术也难以使某些成分完全分离; 二是由于中药成分复杂...
中药有效成分的分析有其特殊的复杂性, 首先是中药品种繁多, 不同品种间活性成分的含量相差悬殊; 其次中药有效成分受产地、栽培、生长环境和采收季节等多种因素的影响。 用于中药成分分析的方法很多, 其中HPLC 最常用。但用HPLC 进行中药成分分析常遇到一些问题,一是分析时间长、分离效率低, 即使采用梯度洗脱技术也难以使某些成分完全分离; 二是由于中药成分复杂...
区带电泳 (zone electrophoresis):是指有支持介质的电泳,待 分离物 质在支持介质上分离成若干区带。 又称电 色谱法 (electrochromatography),或区域离子电泳。是电泳技术中的一类(参见电泳)。区带电泳是一种应用比较广泛的电泳方法。 带电颗粒在电场作用下于液体中移动,除颗粒受电场作用之外,也受到 溶质 颗粒与固相载体吸...
细胞电泳 (cell electrophoresis) 将 细胞 制备成悬浮溶液,使其单个游离的细胞分散于等渗的介质中,在电场作用下,细胞在电泳室内发生运动,这种现象称为细胞电泳。 原理 : 在一定PH值下 细胞表面 带有净的正或负电荷,能在外加电场的作用下发生泳动,这种现象称为细胞电泳。引起细胞电泳的 电位 值称为ξ电位。各种细胞或处于不同 生理 状态的同...
【 电泳法 】是指带电荷的供试品( 蛋白质 、 核苷酸 等)在惰性支持介质(如纸、 醋酸纤维素 、 琼脂糖 凝胶、 聚丙烯酰胺凝胶 等)中,于电场的作用下,向其对应的 电极 方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其含量(%)的方法。 【分类】 ● 1.纸电泳法 操作法 (1) 电泳 缓冲液 枸橼酸盐 缓冲液...
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