通过 大肠埃希菌 繁殖而 增殖 重组质粒 ，也是 扩增 核酸 的手段。但在 试管 中有效扩增 DNA 的方法，是在90年代才开展起来的 多聚酶 链反应（polymerase chain reaction，PCR）新技术。由于PCR灵敏度高、特异性好、操作方便，在我国发展很快。目前，PCR技术结合 分子 生物学 实验技术（如 逆转录 反应杂交技术等）开发了许多...
通过大肠埃希菌繁殖而增殖重组质粒，也是扩增核酸的手段。但在试管中有效扩增DNA的方法，是在90年代才开展起来的多聚酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）新技术。由于PCR灵敏度高、特异性好、操作方便，在我国发展很快。目前，PCR技术结合分子生物学实验技术（如逆转录反应杂交技术等）开发了许多PCR新技术（reverse tran...
...合的能力。其一端连接DNA（标记物），另一端连接抗原-抗体复合物，形成一个特殊的抗原-抗体-DNA连接物。作为标记物的DNA分子可用PCR的扩增，存在特异的PCR产物应证明作为标记物的DNA分子已特异地与抗原-抗体复合物结合，而且表明了抗原的存在。有人采用SAP（streptavidin – protein A）嵌合体作为中介物。它具有双特异性结合能力，一端...
...、系数、倍数、作用等)、扩大和扩充等。 在生命科学中引伸至诸如级联机理、气体放大作用、个体或 细胞 的 增殖 、 分子 的体外增殖，即 基因扩增 （gene amplification）等。 至20世纪末，“ 扩增 ”通常是指基因扩增，尤其是采用不断改进的 聚合酶链式反应 (PCR)后，使 基因 能在体外扩增2至几万道尔顿长度的DNA分子变成可能，经扩增后其...
...链反应 （polymerasechain reaction简称PCR）又称无细胞 分子克隆 系统或特异性 DNA 序列体外 引物 定向酶促 扩增 法，是 基因扩增 技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍，从而大大提高对DNA 分子 的分析和检测能力，能检测单分子DNA或对每10万个 细胞 中仅含1个靶DNA分子的样品，因而此方法立即在分子...
在获得特异的目的基因后，可用以下方法大量扩增制备：①用体外DNA重组技术与载体DNA相连，转化至大肠杆菌中进行无性繁殖。以氯化铯超速离心纯化重组质粒DNA，并以合适限制性内切酶消化，经凝胶电泳制备回收特异的目的核酸片段。②聚合酶链式反应（Poly－merase chain reaction, PCR）扩增技术：利用这种先进技术能简便快速制备大量特异性目的核酸...
...呈现地方流行性。fmd带来了非常大的经济损失。因此需要一种灵敏的检测方法在帮助减少误杀未感染畜群的同时，也有利于口蹄疫的监测。 近年来，依赖核酸序列的扩增技术(nasba)经常被用来检测如 禽流感 病毒、新城疫病毒、病毒和口蹄疫病毒等引起的病毒性疾病。最近有学者通过检测从世界各地收集的200份疑似口蹄疫病毒感染样品，对nasba-电化学发光法(nasba-e...
扩增反应并不是可以无穷地进行下去的，经过一定的循环周期后需扩增的片段不再按指数增多而逐渐进入平坡；进入平坡的循环次数，取决于起始时存在的模板拷贝数以及合成的DNA总量。所谓平坡就是批PCR循环的后期，合成产物达0.3～1pmol时，由于产物的堆积，使原来以指数增加的速率变成平坦的曲线。 造成PCR进入平坡的原因有：引物和dNTP等消耗完毕、Taq酶失活，这几...
扩增样本中的RNA，一般要先将其逆转录成cDNA，再以cDNA为模板进行PCR扩增，能否将RNA靶序列直接扩增出来呢？Kwok等 人发 明了TAS来解决这一问题。结合应用葡聚糖珠寡核苷酸杂交技术可进一步提高方法的特异性和效率。其原理是：制备引物A、B，引物A与待检RNA3’端互补，并有一T 7 RNA多聚酶的识别结合位点。逆转录酶以A为起点合成cDNA；引物...
基因扩增 (gene amplification) 细胞内选择性复制DNA, 产生大量的拷贝。如 两栖类卵母细胞 在发育的早期，rRNA 基因 的数量 扩增 到1000多倍。基因扩增是通过形成几千个核进行的，每个核里含有几百拷贝的编码28S、18S和5.8S的rRNA基因，最后 卵母细胞 中的这些rRNA基因的拷贝数几乎达到50万个，而在相同生物的其它类型 ...
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