用于 软组织肿瘤 可在石蜡切片表达的抗体已有多种，请参见表12-1。 表12-1 软组织细胞可用的标记抗体 抗原名称 标记细胞 （1）角蛋白（Keratin） 上皮与肌上皮细胞 （2）波纹蛋（Vimentin） 间叶分化细胞、内皮细胞 （3）结蛋白（Desmin） 肌组织分化细胞 （4）肌动蛋白（Actin） 肌细胞，肌上皮细胞，肌纤维 （5）肌浆球蛋白（M...
用 荧光素 、 同位素 或 酶标记 抗体 或 抗原 ，用于抗原或抗体检测是目前广泛应用的敏感、可靠的方法。上述三种常用的 标记物 与抗原或抗体 化学 连接之后不改变后者的 免疫 特性。本方法可用于定性、定量或定位检测。 1． 免疫荧光技术 免疫荧光技术（immunofluorescencetechni）是用化学方法使荧光素标记的抗体（或抗原）与组织或 细胞 ...
用荧光素、同位素或酶标记抗体或抗原，用于抗原或抗体检测是目前广泛应用的敏感、可靠的方法。上述三种常用的标记物与抗原或抗体化学连接之后不改变后者的免疫特性。本方法可用于定性、定量或定位检测。 1．免疫荧光技术 免疫荧光技术（immunofluorescencetechni）是用化学方法使荧光素标记的抗体（或抗原）与组织或细胞中的相应抗原（或抗体）结合，进行定性...
由于酶标抗体存在一些缺点，例如①酶与抗体间的共价连结可损害部分抗体和酶的活性；②抗血清中的非特异性抗体被酶标记后，与组织成分结合，可致背景染色等。为此Sternberger等在酶标法的基础上，发展了非标记抗体酶法。包括酶桥法（Enzyme Bridge Method）和过氧化物酶抗过氧化物酶法（PeroxidaseAntiperoxidase Method,...
胶体铁的等电点为7.8至7.9,在pH7.4时通过离子键能与抗体IgG(pH5.8～7.3)结合而不影响抗体活性,在此条件下,Seno＇对Hale＇胶体铁进行了抗体标记,并成功用于免疫细胞化学染色(Seno,et al.1989),抗体标记时,用0.1mol/L碳酸钾将胶体的pH调至7.4按每毫升脱体铁0.2～1mg的蛋白量,将IgG在电磁搅拌下逐滴加入到胶...
1．Marsshall 氏法 （1）材料：抗体球蛋白溶液、0.5mol/l pH9.0碳酸盐缓冲液、无菌生理盐水、异硫氰酸荧光素、1%硫柳汞水溶液、三角烧瓶（25～50ml）、冰及冰槽（或1000ml烧杯）、电磁搅拌器、灭菌吸管、透析袋、玻棒、棉线及烧杯（500ml）、pH7.2或8.0的0.01mol/L PBS等。 （2）方法及步骤： ①抗体的准备：取适...
用免疫斑点法或免疫细胞化学染色等方法可鉴定抗体的标记效果 1．免疫斑点法 在处理好的硝酸纤维素膜上分别滴加100～10-7系列稀释的抗原，斑点直径0.25cm, 空气中干燥，80℃多聚甲醛蒸气固定1h，然后分别以胶体铁标记的抗体一步法或用桥抗联接胶体铁标记物的间接法染色，普鲁士蓝呈色观察。一步法所难检测到的抗原量为10-２～10-３μg,间接法 敏感性至少增...
取1g RB200及PCL52g放在乳钵中研磨5min（在通风橱中）。然后加入10ml无水丙酮，放置5min，不断搅拌。过滤，用滤液进行标记抗体。剩余部分吸附在滤纸上，4℃干燥保存。 取抗体（20mg/ml）每毫升加入生理盐水和0.5mol/l pH9.0的碳酸盐缓冲液各1ml稀释。逐滴加入0.1ml RB200溶液，边加入边搅拌，在0～4℃中结合12～18...
Kbaffan等（1986）首先创立了蓝色荧光素标记和染色技术，可进行双标记或多标记。 （1）取7-氨基-4-甲基香豆素（7-amino-4-methyl coumarin, AMC）260μg溶于二甲亚砜25μl中。 （2）将上液加入10ml IgG的 巴比妥缓冲液（0.5mol/L,pH8.5,内含50～100mg IgG）中，室温反应2h，过Sepha...
不论使用何种制备方法，要获得合格的标记化合物，都必须将反应物经过仔细的分离、纯化。另外，一些标记化合物，经过一定时间的存放后，往往会出现不纯物，而需再纯化。如碘标记生长激素（ 125 --HGH）,在刚标记的第2天，从Sephadex G-100过滤谱上可见，几乎所有的碘化HGH都集中在峰II；保存1个月后，峰II组份减少，峰I和峰III成分明显增加，峰I是...
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