IGSS染色的半薄切片,可以在光镜下直接观察阳性结果,为电镱取阳性部位及观察打下良好的基础。环氧树脂会妨碍免疫组化染色。经过饿酸处理后固定的组织同样也会影响抗原抗体反应,因此,半薄切片作IGSS染色剂,应作以下处理。 (1)脱环氧树脂,切片以NaOH的无水乙醇饱和溶液浸泡30~60min,然后以无水乙醇洗5min,两次,再以95%,80%,70%酒精各洗5m...
作冰冻切片的组织,若在动物试验可以先经过固定液灌注或浸泡固定,也可不固定先做冰冻切片。人的组织也可通过浸泡固定或不固定,这主要根据保存抗原性的需要而定。固定过的组织可用20%蔗糖PBS(0.01mol/l pH7.2)浸泡2~4h或在切片时用OCT包埋,以减少冰冻切片过程中冰晶的形成。如果切片还准备用于电镜包埋,则可经过5%,10%,20%浓度逐级递增的蔗糖...
以人肝细胞内HBsAg定位举例说明。 (1)切片常规脱蜡至水。 (2)Lugol's液,5min. (3)5%硫代硫酸钠水溶液脱碘5min。 (4)用双蒸馏水冲洗干净。 (5)0.05mol/l pH7.4 TBS洗5min两次。 (6)用0.1%胰蛋白酶消化10min或用3mol/L尿素消化20min。 (7)0.05mol/l pH7.4 TBS洗5mi...
(一)背景染色产生的原因和防止方法 (1)第一抗体或金标抗体稀释度不合适,一般容易犯抗体使用过浓的毛病,认为抗体越浓越好,结果适得其反。应该先作方阵滴定,优选最佳稀释倍数(见第一章 ),即可避免非特异性染色,又可节 省抗体。 (2)使用正常箅清封闭和在抗体稀释液中加入 牛血 清白蛋白,可以减少非特异吸附,降低背景染色。 (3)显色的器皿必须彻底清洗,化学试剂...
一microtome 制作 细胞 或 组织切片 的机器。用于 光学显微镜 的有旋转式和滑走式 切片机 。用于 电子显微镜 的有 超薄切片机 ,使用玻璃刀或钻石刀制作 超薄切片 。材料的装置有机械推进式和热膨胀式。用于 冷冻 切片法 的有冷冻切片机、 低温 恒温器、冷冻超薄切片机。用于徒手切片的有圆筒切片机(cylinder microtome)。 参考:切片...
电子束穿透力很弱,须将 标本 制成40~50的 超薄切片 .方法与步骤: 锇酸 和 戊二醛 固定样品-> 丙酮 逐级 脱水 -> 环氧树脂 包埋_>以热膨胀或机械伸缩的方式切片_>重金属(铀,铅)盐 染色 .
组织切片 指以生物组织为材料,处理为薄片,应用于玻片以适合 显微镜 之观察。此为 组织学 发展的重要工具及方法。常伴随着显微镜技术的发与玻片的制作技术改进而发展。组织切片广泛应用在 生物学 、医学( 病理学 、 传染病学 等)、农学(植物病理学)等领域。 切片的种类 生物学里的 切片 是指将材料以工具(如 刀片 、 切片机 )切成适合以显微镜观察的薄片之手续...
石蜡切片 (paraffin section) 组织学 常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常 细胞组织 的形态结构,也是 病理学 和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。教学中,光镜下观察切片 标本 多数是石蜡切片法制备的。活的 细胞 或组织多为无色透明,各种组织间...
...定后,置于含4.5%的蔗糖PBS(0.05mol/l pH7.2),4 ℃ 中漂洗,换数次固定液,过夜。 (2)随后,作10~40μm的冰冻切片,放入第一抗体血清作用12~18h,4℃,用含蔗糖的PBS洗数次。 (3)置于HRP标记抗体液(第二抗体)4 ℃ 过夜。然后用4℃含蔗糖PBS反复冲洗数次。4 ℃ 浸漂过夜。 (4)2.5%戊二醛(pH7.4磷酸缓冲...
中药材切片暴露在空气中很容易受到微生物和杂质的污染发生腐烂变质。现将延长中药材切片保鲜期的方法介绍如下: 1.选料、清洗。选择新鲜、无腐烂变质的中药材,用去离子水或杀菌水清洗干净,沥干表面水分备用。 2.切片。可根据药材的质地和作用的不同,将需要切片的药材切成薄片、中片、厚片、段、块或丝。 3.配制保鲜液。保鲜液配方: 柠檬酸0.1%,肌醇六磷酸酯复配液0....
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