是一种常使用于 分子 生物学 的工具,可将遗传物质带入 细胞 ,原理是利用 病毒 具有传送其 基因组 进入其他细胞,进行 感染 的分子机制。可发生于完整活体( in vivo )或是 细胞培养 ( in vitro )中。可应用于基础研究、 基因 疗法 或 疫苗 。 可供利用的病毒可分为 逆转录病毒 、慢病毒与 腺病毒 。 1 .分为: 噬菌体 载体、杆状 ...
质粒 和 噬菌体 载体只能在 细菌 中繁殖,不能满足 真核 DNA重组 需要。 感染 动物的 病毒 可改造用作 动物细胞 的载体。由于动物细胞的培养和操作较复杂、花费也较多,因而 病毒载体 构建时一般都把细菌质粒复制起始序列放置其中。使载体及其携带的外来序列能方便地在细菌中繁殖和克隆,然后再引入 真核细胞 。目前病毒载体常用者有改造来自猴 肾病 毒SV40(...
质粒和噬菌体载体只能在细菌中繁殖,不能满足真核DNA重组需要。感染动物的病毒可改造用作动物细胞的载体。由于动物细胞的培养和操作较复杂、花费也较多,因而病毒载体构建时一般都把细菌质粒复制起始序列放置其中。使载体及其携带的外来序列能方便地在细菌中繁殖和克隆,然后再引入真核细胞。目前病毒载体常用者有改造来自猴肾病毒SV40(Simian Virus 40)、逆转录...
根据 流感病毒 感染的对象,可以将 病毒 分为 人类流感病毒 、 猪流感病毒 、 马流感病毒 以及 禽流感病毒 等类群,除了人类流感病毒以外,都称为动物流感病毒,也就是这部分 流感病毒 专门感染动物的,不是针对人的,比如 禽流感 病毒、 猪流感 病毒。但现在偶尔也用人感染动物流感病毒的报告,比如 人感染H7N9禽流感 。 本来动物流感病毒只是造成动物之间的流...
我国在SARS病原诊断方面获重要进展。解放军302医院临床检验中心副主任王海滨带领课题组,近日研制出灵敏性较高的冠状病毒RNA荧光定量PCR诊断方法。经反复测试,SARS病人发病当日即可从血浆和淋巴细胞中检测出冠状病毒RNA,发病一周内的检测阳性率为80.9%。 据专家介绍,对易变异病毒核酸诊断试剂的研制,基因序列的设计与选择起关键作用 。课题组针对这一思路...
噬菌体λ是最主要的一种载体。自从1974年以来,已用野生型λ改造和构建出一系列噬菌体载体。 噬菌体λ是温和噬菌体。基因组是长约50kb的双链DNA分子。在噬菌体λ颗粒中,DNA是线状双链分子带有单链的互补末端。末端长12个核苷酸,这称为粘性末端,简写COS。当噬菌体感染宿主细胞后,双链DNA分子通过COS而成环状。在感染早期,环状DNA分子进行转录。在此期间...
克隆载体 (Cloning Vector):通常采用从 病毒 、 质粒 或高等生物 细胞 中获取的DNA作为克隆载体,在载体上插入合适大小的外源DNA片段,并注意不能破坏载体的自我复制性质。将 重组 后的载体引入到 宿主 细胞中,并在宿主细胞中大量繁殖。常见的载体有质粒, 噬菌粒 , 酵母 人工 染色体 。 对载体的要求:①能在宿主细胞中复制繁殖,而且最好要...
在 免疫应答 中,B 细胞识别 半抗原 ,并提呈载体 表位 给CD4阳性T 细胞 ,Th细胞识别载体表位,故通过载体把特异的T-B细胞之间连接起来,T细胞才能激活B细胞,成为 载体效应 。
穿梭载体 (shuttle vector)是指含有两个 亲缘关系 不同的 复制子 ,能在两种不同的生物中复制的。例如既能在 原核生物 中复制,又能在 真核生物 中复制的载体.这类载体不仅具有 细菌 质粒 的复制原点及 选择标记 基因 ,还有真核生物的 自主复制序列 (ARS)以及选择标记性状,具有多克隆 位点 .通常穿梭载体在细菌中用于克隆, 扩增 克隆的基...
表达载体 (Expression vectors)就是在 克隆载体 基本骨架的基础上增加表达元件(如 启动子 、RBS、 终止子 等),是目的 基因 能够表达的载体。如表达载体pKK223-3是一个具有典型表达结构的 大肠杆菌 表达载体。其基本骨架为来自pBR322和pUC的 质粒 复制起点 和 氨苄青霉素 抗性基因。在表达元件中,有一个杂合tac强启动子和...
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