克隆载体 (Cloning Vector):通常采用从 病毒 、 质粒 或高等生物 细胞 中获取的DNA作为克隆载体,在载体上插入合适大小的外源DNA片段,并注意不能破坏载体的自我复制性质。将 重组 后的载体引入到 宿主 细胞中,并在宿主细胞中大量繁殖。常见的载体有质粒, 噬菌粒 , 酵母 人工 染色体 。 对载体的要求:①能在宿主细胞中复制繁殖,而且最好要...
载体(vector)是指运载外源DNA有效进入受体细胞内的工具。载体同外源DNA在体外重组成DNA重组分子,在进入受体后形成一个复制子,即形成在细胞内能独自进行自我复制的遗传因子。因此,作为载体应该满足以下几方面的要求:①有某种限制酶的一个切点,最好是有许多种限制酶的切点,而且每种酶的切点只有一个;②外源DNA插入后不影响载体在受体细胞中进行自我复制,载体应...
载体(vector)是指运载外源DNA有效进入受体细胞内的工具。载体同外源DNA在体外重组成DNA重组分子,在进入受体后形成一个复制子,即形成在细胞内能独自进行自我复制的遗传因子。因此,作为载体应该满足以下几方面的要求:①有某种限制酶的一个切点,最好是有许多种限制酶的切点,而且每种酶的切点只有一个;②外源DNA插入后不影响载体在受体细胞中进行自我复制,载体应...
载体(vector)是指运载外源DNA有效进入受体细胞内的工具。载体同外源DNA在体外重组成DNA重组分子,在进入受体后形成一个复制子,即形成在细胞内能独自进行自我复制的遗传因子。因此,作为载体应该满足以下几方面的要求:①有某种限制酶的一个切点,最好是有许多种限制酶的切点,而且每种酶的切点只有一个;②外源DNA插入后不影响载体在受体细胞中进行自我复制,载体应...
在 分子 水平上提供一种 纯化 和 扩增 特定DNA片段的方法。常含有目的 基因 ,用体外 重组 方法将它们插入 克隆载体 ,形成重组克隆载体,通过转化与 转导 的方式,引入适合的寄主体内得到复制与扩增,然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体,可以得到插入DNA的许多拷贝,从而获得目的基因的扩增。 克隆(clone,clon)一词源于希腊文Klon,...
...njugation),通过这细管遗传物质可在两个细菌间传递。 ③质粒对宿主生存并不是必需的。这点不同于 线粒体 ,线粒体DNA也是环状双链 分子 ,也有独立复制的调控,但线粒体的功能是细胞生存所必需的。线粒体是细胞的一部分,质粒也往往有其 表型 ,其表现不是宿主生存所必需的,但也不妨碍宿主的生存。某些质粒携带的基因功能有利于宿主细胞的特定条件下生存,例如,细...
...类 病毒 ,有的噬菌体 基因组 较大,加入λ噬菌和T噬菌体等;有的则较小,如M13、f1、fd噬菌体等。用感染 大肠杆菌 的λ噬菌体改造成的载体应用最为广泛。 λ噬菌体由头和尾构成,其基因组是长约49kb的线性双链 DNA 分子 ,组装在 头部 蛋白质 外壳内部,其序列已被全部测出。λ噬菌体感染时,通过 尾管 将基因组DNA注入大肠杆菌,而将其蛋白质外壳留在...
质粒 和 噬菌体 载体只能在 细菌 中繁殖,不能满足 真核 DNA重组 需要。 感染 动物的 病毒 可改造用作 动物细胞 的载体。由于动物细胞的培养和操作较复杂、花费也较多,因而 病毒载体 构建时一般都把细菌质粒复制起始序列放置其中。使载体及其携带的外来序列能方便地在细菌中繁殖和克隆,然后再引入 真核细胞 。目前病毒载体常用者有改造来自猴 肾病 毒SV40(...
基因工程 是要按人们的意愿去有目的地改造,创建 生物 遗传性,因此其最基本的工程就是要得到目的 基因 或 核酸 序列的克隆。分离或改建的基因和核酸序列自身不能繁殖,需要载体携带它们到合适的 细胞 中复制和表现功能。对理想的基因工程载体一般至少有以下几点要求: ①能在 宿主 细胞中复制繁殖,而且最好要有较高的自主复制能力。 ②容易进入宿主细胞,而且进入效率越高...
近年来,利用淋巴系统转运药物研究淋巴靶向给药已引起人们极大的关注。淋巴靶向给药不仅可提高抗癌药物的疗效,同时也可提高口服大分子药物的吸收或达到黏膜免疫的目的。淋巴靶向给药研究较多的是高分子靶向抗肿瘤药物,其重点在于寻找选择性更强、治疗效果更好的载药体系。通过制剂学的手段,如应用乳剂、脂质体、纳米粒等给药系统可以达到良好的淋巴靶向效果。 淋巴靶向给药载体的选择...
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