...切的一个DNA片段时，一般的做法是如图23-4所示。图23-4 pBR322克隆DNA片段的程序从图23-4可见，外源DNA片段同pBR322都经Bam HⅠ酶切，所以有相同的单链“粘性末端”，通过DNA连接酶可以构成重组DNA分子。由于...
...序列，包括在大肠杆菌中起作用的复制起始序列、能用在细菌中筛选克隆的抗药性基因标志等，以便插入真核基因后能先在很方便操作的大肠杆菌系统中筛选获得目的重组DNA克隆、并复制繁殖得到足够使用的数量。②在真核宿主细胞中表达重组基因所需要的元件，包括...
...分子生物学中应用最广的限制性内切酶。通常在重组DNA技术提到的限制性核酸内切酶主要指Ⅱ类酶而言。表20-1 DNA重组技术中最常用的工具酶酶主要用途限制性核酸内切酶识别DNA特定序列，切断DNA链DNA聚合酶Ⅰ或其大片段（Klenow）①缺口平移...
...C区。人和鼠Cκ距最后一个Jκ基因片段约2.5kb。Vκ与Cκ之间以随机的方式发生重组连接。人κ轻链V基因的排列多样性约为100Vκ×5Jκ=500。（二）λ链基因的结构和重排小鼠Igλ轻链基因结构见表3-4。在大多数近交系小鼠中，有4个J...
...咽喉烧伤及化学伤（burn and chemical injuries ofpharynx and larynx）因吸入高热蒸汽、误饮沸水、头颈烧伤者因吸入火焰或干热空气致粘膜烧伤、误服强酸、强碱、吸入氨、氰、氯、碘、溴、磷等高浓度气雾和...
...PCR循环中选用的变性温度，不宜高于95℃。Taq酶现已可用基因重组的方法生产，商品名为Ampli Taq（Cetus公司）。Taq酶的完整基因长2499bp，在大肠杆菌中表达生产，含832个氨基酸。在氨基酸序列上与大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ有38...
...的胸腺肽α1中试发酵工艺和纯化工艺。该项研究——“重组人胸腺肽α1高效表达平台的建立、中试工艺及其药学研究”近日获得上海市药学会2005年上海药学科技奖三等奖。 胸腺肽α1（Tα1）是由28个氨基酸组成的小肽，具有免疫增强活性，促进T...
...and control gene）是指某些可调节控制结构基因表达的基因。调控基因的突变可以影响一个或多个结构基因的功能，或导致一个或多个蛋白质（或酶）时的改变。此外，还有一些只转录而不翻译的基因，如核糖体RNA基因（ribosomal RNA...
...的各种限制性内切酶进行酶切和杂交。1974年首次用RFLP作为遗传学分析的方法。1978年简悦威和Dozy等第一次用人体β珠蛋白基因作为探针，同限制酶Hpa Ⅰ酶切的DNA做杂交，发现了DNA的RFLP与镰形细胞贫血之间的关系（表23-4）...
...一个含有两个切口的开环分子。因为环化DNA（即使只带切口的环状DNA）的转化效率比线状DNA高得多，所以大多数转化体都含有重组质粒，如图24-2所示。图24-2 利用磷酸酶防止载体DNA的重新环化（三）外源DNA带有平端的片段外源DNA片段...
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