核酸的序列分析，即核酸一级结构的测定，是现代分子生物学中一项重要技术。目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等（1977年）提出的双脱氧链终止法及Maxam和Gilbert（1977年）提出的化学降解法，其中双脱氧链终止法是目前应用最多，最好的技术。 一、Sanger双脱氧链终止法原理 通常DNA的复制需要：DNA聚合酶，单链DNA模板，带有3'-OH...
基因工程 又称 遗传工程 ，是 生物 工程的主导技术。 DNA重组 技术或 分子克隆 是基因工程的核心。 分子 生物学 研究中发现的许多 核酸酶 类都可用作基因工程的工具。其中能识别特定的 回文序列 并切割 DNA 双链的Ⅱ类限制性 核酸内切酶 在DNA重组技术中被广泛应用。 当前目的 基因 序列主要来源于自然界的生物，无性繁殖的纯基因称为基因克隆，目的基因...
近20年来分子克隆技术的发展突飞猛进，重组DNA操作技术包括的范围不断扩大，DNA克隆的方法亦多种多样，特别是PCR技术的应用，以及RFLP、SSCP等技术的开展，使得DNA克隆技术的应用日益广泛。 DNA克隆技术在 动脉粥样硬化 等疾病的病因及诊疗研究中也有重要的作用。例如在研究脂蛋白酯酶基因发生的特异突变时，可以设计合成扩增引物，进行模板DNA的PCR扩...
自然界绝大多数生物体的遗传信息贮存在DNA的核苷酸排列顺序中。DNA是巨大的生物高分子，一般将细胞内遗传信息的携带者枣染色体所包含的DNA总体称为基因组(genome)。同一物种的基因组DNA含量总是恒定的，不同物种间基因组大小和复杂程度则差异极大，一般讲，进化程度越高的生物体其基因组构成越大、越复杂，见(表15-2)。 表15-2 某些有代表性的生物体内D...
生物合成 biosynthesis 生物体内进行的同化反应的总称。生物合成具有如下几种不同的 生理 意义。（1）合成生长增值所必需的物质。（2）在稳定状态时，合成用于补充消耗掉的成分的物质。（3）为长期和短期的贮藏，进行必要的合成。一般来说，生物合成是 吸能反应 ，多数是朝向使分子结构复杂化的方向进行。能量供给最典型的是由ATP供给，也有通过GTP（例如： ...
生物合成 biosynthesis 生物体内进行的同化反应的总称。生物合成具有如下几种不同的 生理 意义。（1）合成生长增值所必需的物质。（2）在稳定状态时，合成用于补充消耗掉的成分的物质。（3）为长期和短期的贮藏，进行必要的合成。一般来说，生物合成是 吸能反应 ，多数是朝向使分子结构复杂化的方向进行。能量供给最典型的是由ATP供给，也有通过GTP（例如： ...
生物合成 biosynthesis 生物体内进行的同化反应的总称。生物合成具有如下几种不同的 生理 意义。（1）合成生长增值所必需的物质。（2）在稳定状态时，合成用于补充消耗掉的成分的物质。（3）为长期和短期的贮藏，进行必要的合成。一般来说，生物合成是 吸能反应 ，多数是朝向使分子结构复杂化的方向进行。能量供给最典型的是由ATP供给，也有通过GTP（例如： ...
生物合成 biosynthesis 生物体内进行的同化反应的总称。生物合成具有如下几种不同的 生理 意义。（1）合成生长增值所必需的物质。（2）在稳定状态时，合成用于补充消耗掉的成分的物质。（3）为长期和短期的贮藏，进行必要的合成。一般来说，生物合成是 吸能反应 ，多数是朝向使分子结构复杂化的方向进行。能量供给最典型的是由ATP供给，也有通过GTP（例如： ...
从生物组织细胞提取出全部DNA，用物理方法（超声波、搅拌剪力等）或酶法（限制性核酸内切酶的不完全酶解）将DNA降解成预期大小的片段，然后将这些片段与适当的载体（常用噬菌体、粘粒或YAC载体）连接，转入受体细菌或细胞，这样每一个细胞接受了含有一个基因组DNA片段与载体连接的重组DNA分子，而且可以繁殖扩增，许多细胞一起组成一个含有基因组各DNA片段克隆的集合体...
核酸的序列分析，即核酸一级结构的测定，是现代分子生物学中一项重要技术。目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等（1977年）提出的双脱氧链终止法及Maxam和Gilbert（1977年）提出的化学降解法，其中双脱氧链终止法是目前应用最多，最好的技术。 一、Sanger双脱氧链终止法原理 通常DNA的复制需要：DNA聚合酶，单链DNA模板，带有3'-OH...
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