...一种修饰酶,它改变了限制酶识别的DNA顺序的结构,使限制酶不能起作用。限制-修饰系统是细胞的一种防卫手段。如果用噬菌体去感染限制-修饰系统有活性的细菌,噬菌体DNA没有先经修饰,它与先经修饰的噬菌体相比,感染效率要低几个数量级。未经修饰的...
...)表23-3 四种载体的比较 质粒λ噬菌体柯斯质粒单链噬菌体克隆DNA大片段±*++-构建基因组文库-++-构建cDNA文库+---常规的亚克隆化+---构建新型的DNA结构+---序列分析+--+单链探针+**--+外源基因在大肠杆菌中的...
...RNA或DNA结合,漂洗后,用酶标抗DNA:RNA抗体或抗DNA:DNA抗体与杂交物结合。将乳胶颗粒收集,吸附到膜上后漂洗,加入底物显色并进行测定。探针浓度2μg/ml,80℃杂交,可在10~15min完成,检测的敏感性为5×108靶序列。(...
...发现,为DNA双螺旋结构模型的建立提供了重要的依据。(二)DNA的一级结构与蛋白质结构相似,核酸的结构也可分一级结构与空间结构进行讨论。核酸的一级结构是指其多核苷酸链中核苷酸的排列顺序。核酸的空间结构是指多核苷酸链内或链间通过氢键等折叠卷曲的...
...,SDS-PAGE电泳,然而采用Western blotting及immunoblotting鉴定其分子量,进一步利用分子生物学技术克隆信号蛋白,搞清其基因结构和氨基酸序列。二、信号转导中第二信使含量的测定信号转导过程中,第二信使(...
...,故又可称为碱基顺序。核苷酸之间的连接方式是:一个核苷酸的5′位磷酸与下一位核苷酸的3′-OH形成3′,5′磷酸二酯键,构成不分支的线性大分子,其中磷酸基和戊糖基构成DNA链的骨架,可变部分是碱基排列顺序。核酸是有方向性的分子,即核苷酸的...
...速度取决于缓冲溶液的组成、pH值、盐浓度与DNA模板的性质。扩增片段如短于150bp,则可省略延伸这一步,而成为双温循环,因Taq DNA聚合酶在退火温度下足以完成短序列的合成。对于100~300bp之间的短序列片段,采用快速、简便的双温...
...经过限制性内切酶消化和凝胶电泳后,放入碱性溶液中使其变性,将变性后的单链DNA从凝胶中按原来位置和顺序用滤纸吸印转移到硝酸纤维膜上,然后再与标记探针杂交。此方法比较准确地保持了特异DNA序列在电泳图谱中的位置,而且能测定分子量。试剂:变性液:...
...]。滑膜肉瘤的组织结构复杂,目前尚无统一的分类及预后判定标准。研究表明,滑膜肉瘤患者的预后与其肿瘤细胞核的有丝分裂率有一明显的相关性[2],因此,我们拟应用FCM对其进行回顾性研究,探讨DNA含量在滑膜肉瘤患者预后判定中的作用。 1材料与...
...后则分为两条区带,即重密度带(15N-DNA)及低密度带(14N-DNA)。它们的实验只有用半保留复制的理论才能得到圆满的解释(图16-2和16-3)。图16-2 DNA的半保留复制第一代分子含有一条亲代的链(用黑色素示),与另一条新合成的...
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