核酸的序列分析，即核酸一级结构的测定，是现代分子生物学中一项重要技术。目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等（1977年）提出的双脱氧链终止法及Maxam和Gilbert（1977年）提出的化学降解法，其中双脱氧链终止法是目前应用最多，最好的技术。 一、Sanger双脱氧链终止法原理 通常DNA的复制需要：DNA聚合酶，单链DNA模板，带有3'-OH...
基因探针 （probe）就是一段与目的 基因 或 DNA 互补的特异 核苷酸序列 ，它可以包括整个基因，也可以仅仅是/基因的一部分；可以是DNA本身，也可以是由之 转录 而来的 RNA 。 1． 探针 的来源 DNA探针根据其来源有3种：一种来自 基因组 中有关的基因本身，称为 基因组探针 （genomic probe）；另一种是从相应的基因转录获得了mRN...
DNA 做为遗传物质的基本特点就是在 细胞 分裂前进行准确地自我复制(selfreplication)，使DNA的量成倍增加，这是细胞分裂的物质基础。1953年Watson和Crick提出DNA双 螺旋结构 模型指出，DNA是由二条互补的 脱氧核苷 酸链组成，所以一条DNA链上的 核苷酸 排列顺序是由图16-1双螺旋DNA的复制另一条决定的。这就说明DNA...
基因的复制的以DNA复制为基础的。生物体的遗传特征表现为特定的核苷酸顺序，并以密码子的形式编码在DNA分子上。在细胞分裂过程中，通过DNA准确地自体复制（self-replication），把遗传信息从亲代传给子代，这样，DNA就能真正完成其作为遗传信息载体的使命，从而保证遗传物质的连续性和相对的稳定性。 由于DNA分子两条链的碱基是互补的，一条链上的核苷酸...
...A –NH2 +[HRP ·H2O2]枣→ODA-N = ODA/棕色↓+HRP +H2O ODA：邻-联 茴香 胺。 3．ABC显色体系 DNA –B+ SA – AP→DNa – B – SA或DNa – B +SA - BAP→DNa –B –SA –BAP 经上述两反应，把AP连接在DNA上以后，再进行AP酶显色。这里SA为Streptavidin（...
...（320～400μm）下，可与单链或双链核酸发生反应，反应主要在T上，C上也有一定程度的反应。光敏生物素的连接臂含6～12个碳原子，用以减少探针杂交时的空间位阻。光敏生物素标记核酸，方法简单，灵敏度也可达到pg水平，可用于外源基因的检测。最近出现了一种新的光敏活性DNA生物素试剂，即生物素-聚乙二醇- 当归 素（BPA）。BPA的DNA结合部分是一个活性糖香...
(一) DNA 损伤的原因 1.DNA 分子 的自发性损伤 (1)DNA复制中的错误 以DNA为模板按 碱基配对 进行DNA复制是一个严格而精确的事件，但也不是完全不发生错误的。碱基配对的错误频率约为10-1－10-2，在DNA 复制酶 的作用下 碱基 错误配对频率降到约10-5-10-6，复制过程中如有错误的 核苷酸 参入，DNA 聚合酶 还会暂停催化作用...
近20年来分子克隆技术的发展突飞猛进，重组DNA操作技术包括的范围不断扩大，DNA克隆的方法亦多种多样，特别是PCR技术的应用，以及RFLP、SSCP等技术的开展，使得DNA克隆技术的应用日益广泛。 DNA克隆技术在 动脉粥样硬化 等疾病的病因及诊疗研究中也有重要的作用。例如在研究脂蛋白酯酶基因发生的特异突变时，可以设计合成扩增引物，进行模板DNA的PCR扩...
(一) DNA 的 一级结构 核酸 是由很多 单核苷酸 聚合形成的多聚 核苷酸 (polynucleotide)，DNA的一级结构即是指四种核苷酸(dAMP、dCMP、dGMP、dTMP)按照一定的排列顺序，通过 磷酸二酯键 连接形成的 多核苷酸 ，由于核苷酸之间的差异仅仅是 碱基 的不同，故又可称为 碱基顺序 。核苷酸之间的连接方式是：一个核苷酸的5′位 ...
新华社伦敦10月6日电,在发现脱氧核糖核酸(DNA)的双螺旋结构中作出突出贡献的诺贝尔奖得主、英国科学家莫里斯·威尔金斯5日在伦敦的一家医院去世，享年87岁。 1962年，威尔金斯与英国科学家弗兰西斯·克里克、美国科学家詹姆斯·沃森分享了诺贝尔 生理学 或医学奖。后两位科学家因为1953年首 先在《自然》杂志上发表文章、提出DNA的双螺旋结构模型而享誉世界，...
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