血浆中蛋白质种类繁多,对各种单一蛋白进行快速而又特异的定量。目前公认的方法是免疫测定法,即利用其特异的抗体,采用测定抗原抗体复合物的方式定量。血浆(清)中载脂蛋白是以脂蛋白形式存在的少量蛋白,在解联剂作用下,使载脂蛋白从脂蛋白中分离出来,再利用相应的载脂蛋白抗体进行测定。 载脂蛋白的免疫测定方法很多,目前采用的方法各有其特点,所需条件也有差异,现将医学检验中...
脂蛋白中的蛋白部分称为载脂蛋白(apolipoprotein/apoprotein,Apo)。载脂蛋白在脂蛋白代谢中具有重要的生理作用。作为构成并稳定脂蛋白的结构是脂蛋白结构的支柱;修饰并影响脂蛋白代谢有关的酶活性;作为脂蛋白受体的配体;参与脂蛋白与细胞表 面脂 蛋白受体的结合代谢过程。 载脂蛋白种类很多,一般分为5~7类,其氨基酸序列大多数已阐明,载脂蛋白...
脂蛋白(a)[LP(a)]是1963年Berg研究β-脂蛋白的变异型时发现的,当时测定脂蛋白(a)在人群分布率为30%。目前采用更灵敏的方法发现几乎存在于所有人群中,仅是血浆浓度差异很大,波动在0~1000mg/L的范围。Eaton和Melean等于1987年克隆了人Apo(a)的基因序列,并推导出氨基酸序列。结果提示了Apo(a)的分子结构与纤溶酶原极为相...
脂蛋白(a)[LP(a)]是1963年Berg研究β-脂蛋白的变异型时发现的,当时测定脂蛋白(a)在人群分布率为30%。目前采用更灵敏的方法发现几乎存在于所有人群中,仅是血浆浓度差异很大,波动在0~1000mg/L的范围。Eaton和Melean等于1987年克隆了人Apo(a)的基因序列,并推导出氨基酸序列。结果提示了Apo(a)的分子结构与纤溶酶原极为相...
研究载脂蛋白的前提条件是必须得到各种载脂蛋白的纯品,然而各种载脂蛋白的理化性质、分子量、氨基酸组成及其构象相差很大,因此必须根据各自的特性采用不同的方法进行分离纯化,才能达到获得纯品的目的。有关文献报导,目前分离纯化载脂蛋白方法和仪器种类很多,而常用的方法包括四个步骤即:①分离脂蛋白;②脱脂获得脂蛋白中的载脂蛋白部分即ApoHDL、ApoVLDL、ApoLD...
载脂蛋白分离纯化后,获得了所需要的纯品,该纯品纯度及其品种可通过下述方法进行鉴定。 一、免疫电泳法 免疫电泳法既可用于鉴定蛋白种类,又可鉴定其纯度。 制备1%的琼脂糖,以0.1mmol/L巴比妥缓冲液(0.05μ,pH8.6)为溶剂,制作一块约7×4cm的大小,厚度为0.2~0.3cm的琼脂糖凝胶,以 玻璃 板或薄膜为支持物,于凝胶正中打孔(直径0.2cm)...
一、分离脂蛋白 血浆是分离纯化脂蛋白的首选标本。从血浆(血清)中可分离得到CM、VLDL、LDL和HDL,再经脱脂除去脂蛋白中的脂质,剩下的部分为载脂蛋白的混合物。这一操作过程是获得载脂蛋白的最佳方法。 二、脱脂 由于各种脂蛋白含脂的种类和质量不同,脱脂剂组成略有差异。目前常用的几种脱脂方法有如下几种。 1.Warnick等法 将纯化的脂蛋白慢慢加入到预冷(...
...在氨基酸编码子以外的区域,称为“中性”变化,不导致临床疾病的发生。但是,基因的氨基酸编码区以及基因表达的调控区的DNA序列改变时有发生。导致蛋白质的合成量改变或基功能的异常。载脂蛋白结构基因或其调控区DNA序列的突变引起致 高脂血症 或早发 动脉粥样硬化 已大量见诸于医学文献。新的载脂蛋白基因的多态性不断地被发现。 检测载脂蛋白基因的遗传变异通常使用从外周血...
体外实验表明,载脂蛋白B是难溶于水的蛋白质。目前所知,ApoB族可分为两个亚类,即ApoB 48 和ApoB 100 。ApoB主要成份是B 100 ,其次为B 48 ,其他形式如ApoB 75 ,ApoB 41 ,ApoB 36 等均为ApoB 100 的不同降解产物。
ApoD是HDL中仅次于ApoAⅠ、AⅡ的一种载脂蛋白,在HDL 2 中约占21%,HDL 3 中占43%,VLDL中含有36%,ApoD化学本质是糖蛋白,其糖的组份中含有 葡萄 糖,甘露糖、半 乳糖 、 葡萄 胺和唾液酸。ApoD又称为薄线肽(thinline peptide),其分子量为22100,为一条多肽链,C-末端为 天冬 氨酸、苏氨酸、丙氨酸和丝...
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