...玻璃板上，37℃烤干（过夜）。（5）在乳钵中充分研磨，用120目铜筛筛选过后，分装，密封，低温干燥保存。（二）透析法荧光素如FITC分子可以通过半透膜，而蛋白质大分子不能透过，可将未与蛋白结合的荧光素透析除去。（1）将标记完毕的荧光蛋白液...
...十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPEGE)：由于带负电荷的SDS可与蛋白质多肽链结合，掩盖了蛋白质原有的电荷差别，故可分离分子量不同的蛋白质。 双向凝胶电泳不仅用于蛋白质的分离，同时也用于蛋白质的纯化，一张凝胶可分离纯化出几千个甚至上万个...
...磺代乙酸也可与组氨酸、蛋氨酸和赖氨酸发生反应，但反应条件不同，可通过各种pH及反应时间进行控制。(B)氨乙基化蛋白质分子的几条肽链若以非共价健结合，则用尿素、盐酸胍等变性剂即可拆开。蛋白质的多肽链被拆开后，将它分离纯化，一般多用凝胶过滤、...
...min终止反应。J．摄相。说明：上述各反应均在室温下进行，除了显色反应外，均需振荡或搅拌。（五）排除实验中问题的方法1．DNA不能有效地被标记时考虑（1）用酚/氯仿抽提和/或乙醇沉淀，重新纯化DNA。（2）标记反应的保温时间延长（增至20h）...
...胶体金制备完毕后须经电镜下质量鉴定才能应用。...
...（一）胶体金的颜色溶胶的颜色决定于分散相物质的颜色、分散相物质的散度和入射光线和种类，是散射光还是透射光，粒子越小，分散度越高，则散射光的波长越短，对同一种物质的水溶胶来说，粒子大小不同，颜色亦不同，胶体金颗粒在5～20nm之间，吸收波长...
...研究载脂蛋白的前提条件是必须得到各种载脂蛋白的纯品，然而各种载脂蛋白的理化性质、分子量、氨基酸组成及其构象相差很大，因此必须根据各自的特性采用不同的方法进行分离纯化，才能达到获得纯品的目的。有关文献报导，目前分离纯化载脂蛋白方法和仪器种类...
...第一步是分离纯化蛋白质，然后测定该蛋白的氨基或羟基末端的部分氨基酸序列，然后根据这一序列合成一套寡核苷酸探针。用此探针在DNA文库中筛选，阳性克隆即是目标蛋白的编码基因。值得一提的是真核细胞和原核细胞DNA组织有所不同。真核基因中含有非编码的...
...1．HRP标记凝集素法 适用于小量的凝集素标记（Ponder 1983）。（1）HRP的活化①将10mg HRP(SigmaType VI)溶解在1ml 0.3mol/L 的重碳酸钠溶液中（1.25g/50ml）。②加50μl含1%氟...
...用预先处理好的覆有Formvar膜的镍网浸入胶体金溶液内，取现放在空气中干燥或37℃烤箱烤干。然后在透射电镜下观察，主要观察金颗粒的大小，符合不符合所需要的颗粒直径，金颗粒是否均匀一致，有无椭圆形及多角形金颗粒存在。理想的金颗粒是大小基本...
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