...可以在3’端标记上一个生物素。寡核苷酸35S的3’—末端标记法:将下列液体依次加入Eppendorf管中。寡核苷酸(1 pmol)1μl10×Tailingbuffer 2μl[α-35S]2μl双蒸馏水14μl末端脱氧核苷酸酶1μl(10...
...被称为“间期细胞遗传学分析法(Interphase Cytogenetics Analysis, ICA)。间期细胞遗传学的基本原理是利用合成的特异性DNA探针,标记以同位素、生物素、地高辛或荧光素,对外周血、肿瘤细胞或癌前组织的离散培养...
...从化学和生物学意义上理解,探针是一种分子,它带有供反应后检测的合适标记物,并仅与特异靶分子反应。抗原-抗体、外源凝集素-碳水化合物、亲和素-生物素、受体-配基(ligand)以及互补核酸间的杂交均属于探针-靶分子反应。蛋白质探针(如抗体)...
...DNA的复性速率,并可建立序列复杂度与动力学复杂度间的关系。60年代中期Nygaard 等的研究为应用标记DNA或RNA探针检测固定在硝酸纤维素(NC)膜上的DNA序列奠定了基础。如Brown等应用这一技术评估了爪蟾rRNA基因的拷贝数。...
...大部分人体载脂蛋白基因的染色体定位采用了两种方法:DNA印迹法(Southern blotting);荧光标记原位杂交法(fluorescence insitu hybridization)。DNA印迹法主要是分析从人与老鼠或中国苍鼠体...
.../μl。作者在英皇家研究生院Polak教授实验室应用于放射性标记cRNA探针的浓度为0.5ng/μl,而在非放射性标记(生物素或地高辛)cRNA探针浓度为2.5ng/μl,放射性标记DNA探针浓度为1.0ng/μl。向正华等应用地高辛标记...
...8是用分子杂交法检测RELP示意图。图23-8 分子印迹杂交法则 RFLPs的示意图这是通过限制酶A识别点的改变出现DNA的RFLP,再以合适的DNA片段作为分子杂交的探针,在探针上标记了放射性同位素,同分别经酶A,酶B完全酶切的DNA作...
...situhybridizationImmunocytochemistry)作为组织探针,在发现神经系统特有的蛋白质和肽类方面。具有更高的特异性和灵敏性。重组DNA工程系列用制备的脑的多聚腺苷酸的mRNA,反转录为互补DNa (cDNA),克隆后与组织切片中的mRNA杂交,再按其...
...利用生物素亲和素放大作用染色鉴定。亦可用HCMV、DNA片段或RNA探针与样品进行斑点杂交,夹心杂交或 PCR后勤部的分子杂交来检测,临床最常用的方法是用ELISA法检测孕妇血清 HCMV-IGM来诊断活动性感染。3.人乳头状病毒(human...
...1min,各1min。空气干燥。2.探针标记和纯化用缺口平移法将生物素11-dUTP标记在DNA核酸探针上。3.变性与杂交加20~100ng生物素标记探针到杂交液中,加入5μl 20mg/ml人或鲱鱼精子DNA,总容量为30~40μl,离心...
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