...0和154×2bp。 2.无标记对照DNA2 此管内有20μl pBR328 DNA200μg/ml,已用EcoRⅠ线性化。 3.DNA稀释缓冲液 有两管,每管1ml[成分为:Tris-HCl(10mmol/L),EDTA(1mmol/L),pH8.0(20℃)]内含鲑鱼精DNA(50μg/ml)。 4.标记对照DNA 此管内有50μl线性化pBR328DN...
...而达到分离的目的。用免疫沉淀法或聚阴离子沉淀法使其在琼脂板上沉淀,对于LpX阳性的血清可以在加样孔的阴极端见到白色沉淀带。 2、试剂 巴比妥缓冲液500mmol/L:pH8.6,离子强度0.05。 1%琼脂用上述巴比妥缓冲液加热配制。 沉淀剂;每升中含MgCl 2 0.1mol,肝素2.5g及MaCl9g。 3.仪器:电泳仪。 4.操作: (1)制板 1%琼...
1 试剂 1.1 丙烯酰胺溶液 取丙烯酰胺14g,双丙烯酰胺0.367g,加蒸馏水至50ml。 1.2 缓冲液 Ph7.2,0.2mol /L PB-0.2%SDS:取NaH2PO4·2H2O17.8g,Na2HPQ4·12H2O103g,SDS4g,加蒸馏水至2000ml。 1.3 样品结合液 取10%SDS4ml,0.2mol/L PB0.2ml,甘油1...
1 试剂 1.1 丙烯酰胺溶液 取丙烯酰胺14g,双丙烯酰胺0.367g,加蒸馏水至50ml。 1.2 缓冲液 Ph7.2,0.2mol /L PB-0.2%SDS:取NaH2PO4·2H2O17.8g,Na2HPQ4·12H2O103g,SDS4g,加蒸馏水至2000ml。 1.3 样品结合液 取10%SDS4ml,0.2mol/L PB0.2ml,甘油1...
1 试剂 1.1 丙烯酰胺溶液 取丙烯酰胺14g,双丙烯酰胺0.367g,加蒸馏水至50ml。 1.2 缓冲液 Ph7.2,0.2mol /L PB-0.2%SDS:取NaH2PO4·2H2O17.8g,Na2HPQ4·12H2O103g,SDS4g,加蒸馏水至2000ml。 1.3 样品结合液 取10%SDS4ml,0.2mol/L PB0.2ml,甘油1...
...4℃冰箱过夜,于第二天离心(3750r/min)30min,将离心后的沉淀物溶解在12%NaCl中,而后加0.2mol/l Tris-HCl缓冲液250ml(pH7.4),离心10min,弃去上清,将所得沉淀用0.02mol/l Tris-HCl再洗一次,此步骤要重复3次。将最后得到的VLDL和LDL溶解在7.5~15ml的1mol/L草酸钾中(4℃),37...
...均有其发光底物,由此建立的CLEIA均在临床检验中应用。 (一)HRP标记的CLEIA 常用的底物为鲁米诺或其衍生物。鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行,通常以0.1mol/LpH8.6Tris缓冲液作底物液,鲁米诺和H 2 O 2 在无HRP催化时也能缓慢自发发光,而在最后光强度测定中造成空白干扰,因而宜分别配制成2瓶试剂溶液,只在用前即刻混合。 HRP催...
...病 6. 50~100单位透明质酸酶直流电阳极导入。 每日一次 25~30分钟 18次 适应症: 烧伤 或手术后新鲜瘢痕,手掌挛缩,外伤肿胀、血肿,硬皮症,婴幼儿肌性 斜颈 。 注:透明质酸酶药液不稳定,应临用前配制,溶剂用缓冲液(0.1M醋酸钠11.42克,冰醋酸0.932ml,蒸馏水加至100ml),每安瓿药物150单位,加缓冲液250ml。 (杨永辉)
...探针。此法可标记单链或双链DNA或RNA,及寡核苷酸。灵敏度与放射性探针相当。标记方法:取DNA或片段0.5μg加50μlTE(pH8.0)缓冲液中,再加入5μlg生物素- 补骨脂 素,溶解后,置365nm紫外光下直接照射20min,距离5cm,加等体积TE,移入用TE平衡的Sephadex G—50 柱(高1.0cm),离心法过柱,收集液体即为Bio –D...
...aCl pH7.5,分别依次把膜平铺于滤纸上,各中和15分钟,中和后膜的pH为7.2-7.5。于80℃,30-45分钟烘干。(RNA分析点样缓冲液系统不同,无需变性,中和,余大致相同)用塑料封口机把膜和2.5ml预杂交缓冲液封入塑料袋中,42℃,水浴30分钟。 预杂交缓冲液: 65℃6xSSC (原液:20xSSPE) 5xDenhardt (50xDenh...
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