1．杂交膜的选用杂交膜是一种多孔、表面积很大的固相载体，核酸一旦固定在上面，就可用杂交法进行检测。最常使用的膜是硝酸纤维素膜，用于放射性和非放射笥标记探针都很方便，产生的本底浅，与核酸结合的化学性质不是很清楚，推测为非共价键结合。经80℃烤干2h和杂交处理后，核酸仍不会脱落。硝酸纤维素膜的另一特点是只与蛋白有微弱非特异结合，这在使用非同位素探针中尤为有用。硝...
...是正当的救命稻草呢？至今没有任何体育团体做出这种界定，也构制定相应的规定。 ▲干细胞兴奋剂疗法应被禁止 非治疗性的单纯以提高运动员比赛成绩为目的的干细胞疗法完全违背了公平、公正的奥林匹克精神。世界反兴奋剂机构((WADA)颁布的《2008年禁用清单》中明确规定了禁用3种方法来提高运动员的运动能力，其中一种方法就是使用基因兴奋剂——基因调控的方法，即禁止非治疗...
目的序列与载体DNA正确连接的效率、重组导入细胞的效率都不是百分之百的，因而最后生长繁殖出来的细胞并不同都带有目的序列。一般一个载体只携带某一段外源DNA，一个细胞只接受一个重组DNA分子。最后培养出来的细胞群中只有一部分、甚至只有很小一部分是含有目的序列的重组体（recombinant）。将目的重组体筛选出来就等于获得了目的序列的克隆，所以筛选(dcree...
放射性标记核酸探针在使用中的限制，促使非放射性标记核酸探针的研制迅速发展，在许多方面已代替放射性标记，推动分子杂交技术的广泛应用。目前已形成两大类非放射标记核酸技术，即酶促反应标记法和化学修饰标记法。 酶促反应标记探针是用缺口平移法，随机引物法或末端加尾法等把修饰的核苷酸如生物素-11-dUTP掺入到探针DNA中，制成标记探针，敏感度高于化学修饰法，但操作程...
又称抗代谢药，是模拟正常 代谢物 质，如 叶酸 、嘌呤碱、 嘧啶 碱等的 化学 结构所合成的类似物，与有关代谢物质发生特异性的 拮抗作用 ，从而干扰 核酸 ，尤其是 DNA 的 生物合成 ，阻止瘤 细胞 的分裂繁殖。它们是 细胞周期 特异性药物，主要作用于S期。
核酸 存在于多种 细胞 ，如 病毒 、 细菌 、 寄生虫 、动植物细胞；多种 标本 中，如 血液 、组织、 唾液 、尿液等其它来源的标本。因此分离方法复杂而多样。又因各种 DNA 、 RNA 的丰度差异，各种分析方法对核酸的纯度与量的要求有差异，因此在实验前应对采用的方法有所了解和选择。总的说来核酸的分离与 纯化 是在溶解细胞的基础上，利用 苯酚 等有机溶剂...
（一）探针的选择 根据不同的杂交实验要求，应选择不同的核酸探针。在大多数情况下，可以选择克隆的DNA或cDNA双链探针。但是在有些情况下，必须选用其它类型的探针如寡核苷酸探针和RNA探针。例如，在检测靶序列上的单个碱基改变时应选用寡核苷酸探针，在检测单链靶序列时应选用与其互补的DNA单链探针（通过克隆人M13噬菌体DNA获得）或RNA探针，寡核苷酸探针也可。...
分子杂交 是 核酸 链以 碱基配对 规则的一种结合方式，是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测，必须将杂交链中的一条用某种可以检测的进行标记，这条链就称为核酸 探针 。因此，核酸探针的制备是分子杂交技术的关键。 放射性同位素 标记是最早采用的也是目前最常用的核酸探针标记方法。常用的放射性同位素有32P和35S。32P因其能量高，信...
PCR温度循环至关重要，PCR扩增仪各参数必须准确。自Perkin –Elmer Cetus公司第一台PCR扩增仪问世以来，现已有几十家不同的厂家在国内外生产和销售PCR扩增仪。在短短的几年间，扩增仪经过几代的发展，不断采用新技术，并且进一步朝方便、实用、高智能化和自动化的方向发展。 为了便于了解和选购适宜的PCR实验设备，现将部分国内外PCR扩增仪列表如下...
核酸 分解的第一步是水解 核苷酸 之间的 磷酸二酯键 ，在高等动植物中都有作用于磷酸二酯键的 核酸酶 。不同来源的核酸酶，其 专一性 、作用方式都有所不同。有些核酸酶只能作用于RNA，称为 核糖核酸酶 （RNase），有些核酸酶只能作用于DNA，称为 脱氧核糖核酸酶 （DNase），有些核酸酶专一性较低，既能作用于RNA也能作用于DNA，因此统称为核酸酶（n...
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