原位杂交组化(ISHH)与免疫组织化学(IHC)结合法是先后用ISHH和IHC在同一切片或两个相邻切片进行染色,这样就可以同一细胞中显示出某种mRNA和相应的蛋白、多肽或其它抗原,从而可更好地了解某一基因的转录和蛋白、多肽合成的动力学。ISHH与IHC结合法可以在相邻切片上分别进行ISHH和IHC染色,也可先后在同一切片上进行ISHH和IHC染色。前者可使I...
...(6)PBS冲洗2×3min。 (7)0.25%乙酸酐(0.1mol/L 三乙醇胺配)10min。 (8)2×SSC冲洗10min。 (9)杂交:如是cDNA探针用前需进行变性处理,载片法时将切片在空气中晾干,加含探针的杂交液10μl于切片上,盖上22×22mm的硅化盖片或相当大小看蜡膜, 3 H标记探针每10μl杂交液含1×10 5 cpm探针, 32 P...
...RNA探针,将其溶于适量的灭菌双蒸水,用紫外分光亮度计测探针的光密度(详第十九章 ),其最佳工作浓度为2μg/ml。 切片的制作、预处理、预杂交、杂交和杂交后冲洗的方法同概述中基本方法一节 。 光敏生物素核酸探针原位杂交组化程序: (1)石蜡切片脱蜡入水后,置0.1mol/l PBS pH7.2冲洗5min;冰冻切片直接入PBS冲洗5min。 (2)0.1m...
...(nuclein);后来他又从鲭鱼 精子 中分离出类似的物质,并指出它是由一种 碱性蛋白质 与一种酸性物质组成的,此酸性物质即是现在所知的 核酸 (nucleic acid)。1944年Oswald Avery,Colin Macleod和Maclyn McCarty发现,一种有夹膜、具 致病性 的 肺炎 球菌中提取的核酸桪NA(deoxyribonucle...
荧光原位杂交 方法是一种 物理图谱 绘制方法,使用 荧光素 标记 探针 ,以检测探针和分裂中期的 染色体 或 分裂间期 的 染色质 的杂交。 荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)是在20世纪80年代末在 放射性 原位杂交技术 的基础上发展起来的一种非放射性 分子 细胞遗传技术,以 荧光标记 取代 同...
检验方法建立的基本要素是特异性和灵敏度,在复杂的物体中,使无法感觉的特定物质进入 人类 的观察范围。核酸杂交检测技术就是利用核酸碱基严格配对的特异性,核酸标记物的灵敏度而建立的检测核酸结构与功能的方法。该法建立以来已有二十年,目前研究实验室用得多,临床实验室用得较少,除成本高外,关键是操作复杂,重复性差,仅能半定量。成本高可随经济发展而缓和,但其它缺点尚需努...
核酸 是生物体内的 高分子化合物 ,包括 DNA 和 RNA 两大类。 一、元素组成 组成核酸的元素有C、H、O、N、P等,与 蛋白质 比较,其组成上有两个特点:一是核酸一般不含元素S,二是核酸中P元素的含量较多并且恒定,约占9~10%。因此,核酸定量测定的经典方法,是以测定P含量来代表核酸量。 二、 化学 组成与基本单位 核酸经水解可得到很多 核苷酸 ,因...
载体(vector)是指运载外源DNA有效进入受体细胞内的工具。载体同外源DNA在体外重组成DNA重组分子,在进入受体后形成一个复制子,即形成在细胞内能独自进行自我复制的遗传因子。因此,作为载体应该满足以下几方面的要求:①有某种限制酶的一个切点,最好是有许多种限制酶的切点,而且每种酶的切点只有一个;②外源DNA插入后不影响载体在受体细胞中进行自我复制,载体应...
核酸是生物体内的高分子化合物,包括DNA和RNA两大类。
核酸是生物体内的高分子化合物,包括DNA和RNA两大类。
所有搜索结果仅供参考,如需解决具体问题请咨询相关领域专业人士。