...分子杂交是核酸链间碱基配对规则的一种结合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测,必须将杂交链中的一条用某种可以检测的分子进行标记,这条链就称为核酸探针。因此,核酸探针的制备是分子杂交技术的关键。最早采用的...
...迄今,一直是血清学和细胞学方法进行HLA抗原结构分析,最近已开始应用分子生物学基因克隆技术进行HLA定型。由于人们已常握了HLA共同和特异的抗原的核苷酸序列,才有可能用此新方法进行组织配型检验。限制酶切片段长度多态性(...
...原核生物和真核生物刚转录生成的tRNA前体一般无生物活性,需要进行①剪切和拼接②碱基修饰③3’-OH连接-ACC结构(图17-18)。图17-18 tRNA前体的加工①tRNA前体在tRNA剪切酶的作用下,切成一定在小的tRNA分子。...
...BluescriptllKS(一)中;最后根据Sanger双脱氧核苷酸终点法测定DNA序列。(章晓联)...
...(1)重链V基因片段:小鼠VH基因片段数目为250~1000个。根据VH基因片段核酸序列的相似性(>80%同源性),至少可分为11个家族(family).人V基因片段约为100个,至少可分为6个家族,每个家族含有2~60个成员不等。V基因...
...分四核苷酸和六核苷酸,其序列旋转对称。切口分开端和粘端,产生3′-OH和5′-P末端。内切酶品种多,使用时应注意温度、缓冲液用量(一般1μg DNA/2-5单位酶)等反应条件。酶识别序列切口Alu Ⅰ…AGCT……AG CT…四核苷酸…...
...引物长度根据统计学计算,长约17个碱基的寡核苷酸序列在人的基因组中可能出现的机率的为1次。因此,引物长度一般最低不少于16个核苷酸,而最高不超过30个核苷酸,最佳长度为20~24个核苷酸。这样短的寡核苷酸在聚合反应温度(通过72℃)下不会...
...切片段长度多态性组织配型法迄今,一直是血清学和细胞学方法进行HLA抗原结构分析,最近已开始应用分子生物学基因克隆技术进行HLA定型。由于人们已常握了HLA共同和特异的抗原的核苷酸序列,才有可能用此新方法进行组织配型检验。限制酶切片段长度...
...又有一定的量,故易于分离纯化和分析,因此对内源性基因的分析,其分析对象多为mRNA分子。mRNA分析最常使用的分子杂交技术有斑点杂交和Northern blot技术以及逆转录PCR(RT-PCR)技术。二、先天性代谢缺陷病(一)苯丙酮尿症...
...,人与牛MTP大亚基单位有94%同源性。在核苷酸和蛋白序列数据库中未发现其他蛋白与之同源。SharpD.等MTP88kD大亚基基因结构进行分析(图7-7)。其基因跨越55~60Kb,由18个外显子组成,外显子1和18也分别包括5'和3'的非...
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